鈣依賴蛋白激酶(CDPK)在植物的信號(hào)傳導(dǎo)和提高植物抗性方面發(fā)揮著重要作用??茖W(xué)家通過(guò)將CDPK基因?qū)霐M南芥(雙子葉植物)中,來(lái)獲得具有抗性的新品種。如圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體和含CDPK基因的DNA片段示意圖,圖中標(biāo)記了限制酶的切割位點(diǎn)。據(jù)此回答下列問(wèn)題:
(1)通過(guò)基因工程,將CDPK基因?qū)霐M南芥中,獲得具有抗性的新品種。利用基因工程育種的原理是 基因重組基因重組。
(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),應(yīng)選取 XbaⅠ和SmalⅠXbaⅠ和SmalⅠ(兩種限制性核酸內(nèi)切酶)分別切割質(zhì)粒和含有目的基因的DNA片段,不選取另兩種限制酶的理由是 用EcoRⅠ切割會(huì)破壞標(biāo)記基因,用HindⅢ切割會(huì)影響破壞目的基因用EcoRⅠ切割會(huì)破壞標(biāo)記基因,用HindⅢ切割會(huì)影響破壞目的基因。
(3)基因表達(dá)載體的組成必須有目的基因、啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因等。其中,啟動(dòng)子的作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄。
(4)用上圖Ti質(zhì)粒將CDPK基因?qū)霐M南芥細(xì)胞通常采用的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。在分子水平檢測(cè)CDPK基因是否成功表達(dá)的方法是 用放射性同位素標(biāo)記的含有CDPK基因的DNA片段作探針檢測(cè)CDPK基因是否導(dǎo)入擬南芥細(xì)胞用放射性同位素標(biāo)記的含有CDPK基因的DNA片段作探針檢測(cè)CDPK基因是否導(dǎo)入擬南芥細(xì)胞。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】基因重組;XbaⅠ和SmalⅠ;用EcoRⅠ切割會(huì)破壞標(biāo)記基因,用HindⅢ切割會(huì)影響破壞目的基因;RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;用放射性同位素標(biāo)記的含有CDPK基因的DNA片段作探針檢測(cè)CDPK基因是否導(dǎo)入擬南芥細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
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