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利用細(xì)菌靶向給藥在腫瘤治療領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注。科研人員改造大腸桿菌,制造出能定點(diǎn)、可控表達(dá)治療性抗體的工程菌。
(1)聚焦超聲能使腫瘤部位的溫度從37℃提升至42℃,可作為工程菌的“溫度開(kāi)關(guān)”。研究人員篩選出3種轉(zhuǎn)錄抑制蛋白,37℃時(shí),轉(zhuǎn)錄抑制蛋白與誘導(dǎo)型啟動(dòng)子結(jié)合,抑制下游綠色熒光蛋白(GFP)基因的轉(zhuǎn)錄;42℃時(shí),轉(zhuǎn)錄抑制蛋白空間結(jié)構(gòu)改變,不再與誘導(dǎo)型啟動(dòng)子結(jié)合。
①研究人員構(gòu)建了圖1所示表達(dá)載體,以篩選最佳感溫元件。除圖中所含元件外,表達(dá)載體還必須具有
復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因、終止子、限制酶酶切位點(diǎn)
復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因、終止子、限制酶酶切位點(diǎn)
等元件。

②檢測(cè)導(dǎo)入不同轉(zhuǎn)錄抑制蛋白基因的大腸桿菌在不同溫度下的熒光強(qiáng)度,結(jié)果如圖2和3所示。最終選擇轉(zhuǎn)錄抑制蛋白C來(lái)構(gòu)建工程菌,理由是
37℃下熒光強(qiáng)度很低,安全性高;42℃下熒光強(qiáng)度提高倍數(shù)最大,靈敏度高
37℃下熒光強(qiáng)度很低,安全性高;42℃下熒光強(qiáng)度提高倍數(shù)最大,靈敏度高

(2)上述表達(dá)載體僅在42℃時(shí)表達(dá),而腫瘤治療需要長(zhǎng)期進(jìn)行??蒲腥藛T繼續(xù)對(duì)表達(dá)載體進(jìn)行如圖4所示改造,整合酶可將P7序列進(jìn)行一次翻轉(zhuǎn)。請(qǐng)?zhí)顚?xiě)下表,預(yù)測(cè)表中培養(yǎng)條件下,改造后的工程菌菌落的顏色。
培養(yǎng)條件 菌落顏色
37℃培養(yǎng)
無(wú)色
無(wú)色
42℃培養(yǎng)
綠色
綠色
42℃處理1h后,37℃培養(yǎng)
綠色
綠色
(3)為得到可用于腫瘤治療的工程菌,需進(jìn)一步改造上述工程菌。請(qǐng)選擇圖5中 X、Y、Z三個(gè)位點(diǎn)中的一個(gè)作為治療性抗體編碼基因的插入位點(diǎn),并說(shuō)明選擇理由。
將治療性抗體編碼基因插入X位點(diǎn),可實(shí)現(xiàn)機(jī)體正常部位不表達(dá),僅當(dāng)腫瘤部位升溫至42℃后,才激活并持續(xù)表達(dá),實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期、定點(diǎn)的腫瘤治療
將治療性抗體編碼基因插入X位點(diǎn),可實(shí)現(xiàn)機(jī)體正常部位不表達(dá),僅當(dāng)腫瘤部位升溫至42℃后,才激活并持續(xù)表達(dá),實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期、定點(diǎn)的腫瘤治療
。

【答案】復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因、終止子、限制酶酶切位點(diǎn);37℃下熒光強(qiáng)度很低,安全性高;42℃下熒光強(qiáng)度提高倍數(shù)最大,靈敏度高;無(wú)色;綠色;綠色;將治療性抗體編碼基因插入X位點(diǎn),可實(shí)現(xiàn)機(jī)體正常部位不表達(dá),僅當(dāng)腫瘤部位升溫至42℃后,才激活并持續(xù)表達(dá),實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期、定點(diǎn)的腫瘤治療
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/7/25 8:0:9組卷:9引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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