螢火蟲發(fā)光是體內熒光素酶催化一系列反應所產生的現象。如果熒光素酶存在于植物體內,也可使植物體發(fā)光。一直以來熒光素酶的惟一來源是從螢火蟲腹部提取。但加利福尼亞大學的一組科學家成功地通過轉基因工程實現了將熒光素酶基因導入到大腸桿菌體內,并在大腸桿菌體內產生熒光素酶。請你根據已有的知識回答下列有關問題:
(1)在此轉基因工程中,目的基因是 熒光素酶基因熒光素酶基因,將目的基因和質粒“縫合”在一起的工具酶是 DNA連接酶DNA連接酶。該酶據來源可以分為兩類,其中 T4-DNA連接酶T4-DNA連接酶既可以“縫合”黏性末端,又可以“縫合”平末端。
(2)將此目的基因導入到大腸桿菌體內需要載體的幫助。選取載體時必須考慮的條件是 能夠在宿主細胞內復制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標記基因能夠在宿主細胞內復制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標記基因。(至少寫出兩點)。
(3)在此基因工程中,將體外重組DNA導入大腸桿菌體內,并使其在細胞內穩(wěn)定保存和表達的過程稱為 轉化轉化。最常用的方法是首先用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌得到 感受態(tài)感受態(tài)細胞。
(4)目的基因是否導入受體細胞,用 DNA分子雜交DNA分子雜交技術來檢測。目的基因是否表達出相應的蛋白質,除了通過大腸桿菌是否發(fā)光來確定外,還可以通過 抗原—抗體抗原—抗體特異性反應來判斷。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】熒光素酶基因;DNA連接酶;T4-DNA連接酶;能夠在宿主細胞內復制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標記基因;轉化;Ca2+;感受態(tài);DNA分子雜交;抗原—抗體
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:2難度:0.7
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