新冠病毒是一種RNA病毒，其主要通過其表面刺突蛋白（S蛋白）與人體細(xì)胞上的“血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）”受體結(jié)合實(shí)現(xiàn)感染。各類新冠病毒疫苗的研發(fā)都是基于這個(gè)主要的理論基礎(chǔ)，即以S蛋白基因?yàn)榘悬c(diǎn)，通過表達(dá)S蛋白，誘導(dǎo)人體產(chǎn)生免疫能力，從而實(shí)現(xiàn)預(yù)防感染的目的。以下是兩條疫苗研究技術(shù)路線：
A.疫苗研究技術(shù)路線1：體外表達(dá)疫苗--重組疫苗。
提取新冠病毒RNA，獲取S蛋白基因，構(gòu)建S蛋白基因表達(dá)載體，導(dǎo)入釀酒酵母，合成并分泌S蛋白質(zhì)（疫苗），注射人體，產(chǎn)生免疫。
B.疫苗研究技術(shù)路線2：體內(nèi)表達(dá)疫苗--病毒載體疫苗。
提取新冠病毒RNA，獲取S蛋白基因，將 S蛋白基因轉(zhuǎn)入復(fù)制缺陷型腺病毒的基因組內(nèi)，獲得疫苗。接種該疫苗后，腺病毒載體會(huì)進(jìn)入人體細(xì)胞，由于基因缺陷，腺病毒本身無法復(fù)制，但其內(nèi)的S蛋白基因會(huì)啟動(dòng)產(chǎn)生S蛋白，這種S蛋白會(huì)從細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外，誘導(dǎo)人體產(chǎn)生免疫。
據(jù)上述材料結(jié)合所學(xué)知識(shí)，回答下列問題：
（1）兩條技術(shù)路線中，獲取S蛋白基因的方法是：提取病毒RNA，通過

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

 過程合成S蛋白基因，再用PCR技術(shù)擴(kuò)增S蛋白基因。設(shè)計(jì)擴(kuò)增S蛋白基因所需的引物時(shí)，不可以將一端引物設(shè)計(jì)為含GAATTC序列，理由是：

引物會(huì)與自身堿基互補(bǔ)配對(duì)，無法與模板鏈結(jié)合（引物與引物之間也可以形成雙鏈，引物會(huì)與自身堿基互補(bǔ)配對(duì)，降低引物與模板間結(jié)合的效率）

引物會(huì)與自身堿基互補(bǔ)配對(duì)，無法與模板鏈結(jié)合（引物與引物之間也可以形成雙鏈，引物會(huì)與自身堿基互補(bǔ)配對(duì)，降低引物與模板間結(jié)合的效率）

。
（2）技術(shù)路線1中，常使用兩種酶切割載體。這里的酶是

限制性核酸內(nèi)切酶

限制性核酸內(nèi)切酶

；與單酶切相比，優(yōu)點(diǎn)是：

避免目的基因與質(zhì)粒（運(yùn)載體）的反向鏈接物，或者目的基因自身連接物與質(zhì)粒自身連接物

避免目的基因與質(zhì)粒（運(yùn)載體）的反向鏈接物，或者目的基因自身連接物與質(zhì)粒自身連接物

。體外表達(dá)技術(shù)在疫苗領(lǐng)域已經(jīng)非常成熟，但由于S蛋白中含有受體酵母菌自身分泌的內(nèi)源蛋白，所以

提純

提純

比較復(fù)雜；
（3）技術(shù)路線2中，相當(dāng)于把人體細(xì)胞當(dāng)作了疫苗工廠，大大簡(jiǎn)化了疫苗生產(chǎn)過程。無法自我復(fù)制的腺病毒也會(huì)被人體免疫機(jī)制清理掉，提高了疫苗的

安全性

安全性

。但是絕大多數(shù)人成長(zhǎng)過程中曾感染過腺病毒，短期內(nèi)體內(nèi)可能存在能中和腺病毒載體的

抗體

抗體

，從而

降低

降低

（用“加強(qiáng)/降低”作答）疫苗效果，這就是預(yù)存免疫。