菊花是重要的觀賞花卉,為增加菊花花色類型,某科研小組從植物A的基因文庫(kù)中選出花色基因C(圖1),并將其與質(zhì)粒(圖2)重組,再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。圖3表示EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題:
(1)利用PCR技術(shù)可擴(kuò)增花色基因C,PCR技術(shù)擴(kuò)增的原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制。
(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),選用BamHⅠ和Sau3AⅠ分別處理基因C和質(zhì)粒,理由是 BamHⅠ和Sau3AⅠ分別切割基因C兩端和質(zhì)粒,產(chǎn)生相同黏性末端便于構(gòu)建重組質(zhì)粒BamHⅠ和Sau3AⅠ分別切割基因C兩端和質(zhì)粒,產(chǎn)生相同黏性末端便于構(gòu)建重組質(zhì)粒;當(dāng)基因C和質(zhì)粒連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
(3)從轉(zhuǎn)基因菊花中提取蛋白質(zhì),首先可用相應(yīng)的抗體進(jìn)行 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交,檢測(cè)花色基因C是否翻譯成相應(yīng)蛋白等,其次,還需要進(jìn)行 個(gè)體個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。
(4)經(jīng)BamHⅠ處理后構(gòu)建的重組質(zhì)粒導(dǎo)入菊花細(xì)胞后,基因C不能表達(dá),原因是質(zhì)粒酶切部位的兩端無(wú) 啟動(dòng)子和終止子啟動(dòng)子和終止子,影響基因C轉(zhuǎn)錄。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】DNA半保留復(fù)制;BamHⅠ和Sau3AⅠ分別切割基因C兩端和質(zhì)粒,產(chǎn)生相同黏性末端便于構(gòu)建重組質(zhì)粒;磷酸二酯鍵;抗原-抗體雜交;個(gè)體;啟動(dòng)子和終止子
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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