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科學(xué)家利用基因工程和細(xì)胞核移植技術(shù)培育了綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬?;玖鞒淌牵簭臒晒馑钢蝎@取目的基因,與有關(guān)載體重組,將其導(dǎo)入豬胎兒的成纖維細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后再將成纖維細(xì)胞核植入去核的卵母細(xì)胞中,最后培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因克隆豬。
(1)成纖維細(xì)胞貼壁生長分裂到表面相互接觸時(shí),就會(huì)停止分裂,這種現(xiàn)象叫做細(xì)胞的
接觸抑制
接觸抑制
。若將成纖維細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng),操作時(shí)首先用
胰蛋白酶
胰蛋白酶
處理成細(xì)胞懸液。
(2)作為核移植受體細(xì)胞的去核卵母細(xì)胞一般處在
MⅡ/減數(shù)第二次分裂中/減數(shù)分裂Ⅱ中期
MⅡ/減數(shù)第二次分裂中/減數(shù)分裂Ⅱ中期
期。目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是
顯微操作去核法
顯微操作去核法
。將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞,通過
電融合
電融合
法使兩細(xì)胞融合,供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞,形成重構(gòu)胚。常通過
電刺激
電刺激
(物理方法)激活重構(gòu)胚,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。
(3)培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí),將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類,數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為
合成
合成
培養(yǎng)基,但通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的
血清
血清
等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的主要作用是
維持培養(yǎng)液的pH
維持培養(yǎng)液的pH
。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量
抗生素
抗生素
。

【答案】接觸抑制;胰蛋白酶;MⅡ/減數(shù)第二次分裂中/減數(shù)分裂Ⅱ中期;顯微操作去核法;電融合;電刺激;合成;血清;維持培養(yǎng)液的pH;抗生素
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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