SARS冠狀病毒(SARS-CoV)的N蛋白是一種重要的結(jié)構(gòu)蛋白,位于病毒顆粒的核心部分,并與病毒RNA結(jié)合。在病毒的包裝等過程中起重要作用。因此制備抗SARS-CoVN蛋白的單克隆抗體(mAb),對于診斷和治療疾病具有重要意義。用SARS-CoV制備單克隆抗體的流程如圖:
(1)為了獲得大量的SARS冠狀病毒N蛋白目的基因,可以采用PCR技術(shù)在體外擴增,該技術(shù)還需要dNTP、耐高溫DNA聚合耐高溫DNA聚合酶以及引物等,擴增三輪需要的引物數(shù)量為1414個。
(2)若雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷,且在高于等電點的pH溶液中帶負電荷。利用瓊脂糖凝膠電泳進行分離和純化DNA分子主要依據(jù)分子量分子量不同,采用外加電場使其分開。在電泳槽中還需要加入標(biāo)準(zhǔn)DNA標(biāo)準(zhǔn)DNA作為參照物進行鑒定。
(3)小鼠被抗原蛋白免疫后,可以從脾臟脾臟中獲取細胞Ⅰ.細胞Ⅰ中可能包含多種能產(chǎn)生抗體的細胞,原因是小鼠曾經(jīng)接觸過其他抗原小鼠曾經(jīng)接觸過其他抗原。
(4)為了分離出只能產(chǎn)生mAb的細胞Ⅱ,需要用抗體檢測(抗原-抗體雜交)抗體檢測(抗原-抗體雜交)技術(shù)對雜交瘤細胞進行篩選。目前可將圖中的SARS冠狀病毒的N蛋白SARS冠狀病毒的N蛋白 作為疫苗,預(yù)防SARS冠狀病毒引發(fā)的疾病。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】耐高溫DNA聚合;14;分子量;標(biāo)準(zhǔn)DNA;脾臟;小鼠曾經(jīng)接觸過其他抗原;抗體檢測(抗原-抗體雜交);SARS冠狀病毒的N蛋白
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:38引用:4難度:0.7
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