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甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì),某甜蛋白基因編碼區(qū)共含1178個堿基對(如圖1)。為改善黃瓜的品質(zhì),科學(xué)家將該甜蛋白基因成功導(dǎo)入黃瓜細胞,得到了轉(zhuǎn)基因植株??茖W(xué)家利用PBI121質(zhì)粒(如圖2),以及兩種限制酶,運用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,將該甜蛋白基因?qū)朦S瓜試管苗葉片細胞,再經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得甜蛋白基因過量表達的轉(zhuǎn)基因黃瓜植株。請回答下列問題:

(1)限制酶切割DNA分子的時候破壞的化學(xué)鍵是
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
。上述實現(xiàn)轉(zhuǎn)基因技術(shù)過程中,科學(xué)家利用了如圖2所示PBI121質(zhì)粒,為了保證目的基因能夠正確插入質(zhì)粒,切割目的基因及PBI121質(zhì)??捎玫南拗泼笧?
SacI、XbaI
SacI、XbaI
,該過程屬于基因工程的核心工作——
基因表達載體的構(gòu)建
基因表達載體的構(gòu)建
,若重組質(zhì)粒利用SacI和HindⅢ切割后能得到
2000
2000
bp左右的片段,則表明目的基因正確插入質(zhì)粒。
(2)轉(zhuǎn)入甜蛋白基因后的黃瓜細胞,轉(zhuǎn)化后應(yīng)在培養(yǎng)基中添加
新霉素
新霉素
(填“新霉素”或“卡那霉素”或“新霉素和卡那霉素”),篩選轉(zhuǎn)化成功的愈傷組織。若要獲得產(chǎn)甜蛋白能力更強的基因,可以對甜蛋白基因進行改造,最終得到更多的甜蛋白,該過程可以通過蛋白質(zhì)工程完成,基本思路為
預(yù)期的甜蛋白功能→設(shè)計預(yù)期的甜蛋白結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)
預(yù)期的甜蛋白功能→設(shè)計預(yù)期的甜蛋白結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)
(用文字和箭頭表示)
(3)下表是鑒定含甜蛋白基因黃瓜植株的4種方法。請預(yù)測同一后代群體中,通過4種方法檢出的含甜蛋白基因黃瓜植株的比例,
方法 檢測對象 檢測目標 檢出的含甜蛋白基因植株的比例
PCR擴增 基因組DNA 甜蛋白基因 P1
分子雜交 總mRNA 甜蛋白基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 P2
抗原—抗體雜交 總蛋白質(zhì) 甜蛋白基因編碼的蛋白質(zhì) P3
測甜度 黃瓜 含甜蛋白基因黃瓜 P4
從小到大依次是
P4、P3、P2、P1
P4、P3、P2、P1
。

【答案】磷酸二酯鍵;SacI、XbaI;基因表達載體的構(gòu)建;2000;新霉素;預(yù)期的甜蛋白功能→設(shè)計預(yù)期的甜蛋白結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì);P4、P3、P2、P1
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/30 8:0:9組卷:7引用:3難度:0.5
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是(  )

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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