在基因工程的操作過程中，有多種方法可檢測目的基因是否導入受體菌?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR檢測法：根據一段已知目的基因的核苷酸序列設計引物引物，對受體菌DNA進行擴增，經過解鏈、復性（退火）復性（退火）、延伸三個步驟的循環(huán)，檢測PCR產物的長度是否與目的基因一致。
（2）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP）在紫外線照射下會發(fā)出綠色熒光。用DNA連接DNA連接酶將目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并與運載體運載體重組后導入受體菌，經培養(yǎng)篩選能發(fā)出綠色熒光的菌落。
（3）環(huán)絲氨酸輔助篩選法：四環(huán)素能使細菌停止生長但不致死；環(huán)絲氨酸能使正常生長的細菌致死，而對停止生長的細菌不致死。某質粒如圖所示（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因），Tetr中插入目的基因后失活。用此質粒構建表達載體，轉化細菌后，結果有3種：未轉化的細菌、含質粒的細菌、含重組質粒的細菌。
①用含有四環(huán)素四環(huán)素和環(huán)絲氨酸環(huán)絲氨酸的培養(yǎng)基對上述3種細菌進行篩選，只有含質粒的細菌被淘汰，理由是含質粒的細菌有Tetr，四環(huán)素對其不起作用；環(huán)絲氨酸使其致死含質粒的細菌有Tetr，四環(huán)素對其不起作用；環(huán)絲氨酸使其致死；
②在上述篩選的基礎上，若要篩選出含重組質粒的細菌，還需使用含有的氨芐青霉素氨芐青霉素培養(yǎng)基。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】引物；復性（退火）；DNA連接；運載體；四環(huán)素；環(huán)絲氨酸；含質粒的細菌有Tetr，四環(huán)素對其不起作用；環(huán)絲氨酸使其致死；氨芐青霉素
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：49難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6