人和大鼠的抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)蛋白是血漿中的一種重要抗凝血因子,主要由肝臟合成。臨床上,人的ATⅢ有預(yù)防和治療急慢性血栓形成的作用。目前,ATⅢ有3種來源,從血漿中純化、用基因工程細胞生產(chǎn)和用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)。
(1)在構(gòu)建ATⅢ基因工程細胞時,可先從肝臟細胞中分離mRNA,通過反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄獲得目的基因cDNA;然后用DNA連接DNA連接酶將目的基因與運載體構(gòu)建成基因表達載體;常用胎兒成纖維細胞作為ATⅢ基因表達載體的受體細胞,原因是該細胞的全能性較高該細胞的全能性較高。
(2)大規(guī)模培養(yǎng)ATⅢ基因工程細胞時,由于動物細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)貼壁生長貼壁生長現(xiàn)象,常在培養(yǎng)容器中加入中空玻璃管,以擴大細胞貼壁生長的附著面積。
(3)還可將ATⅢ基因工程細胞作為供體細胞,采用核移植核移植技術(shù)獲得克隆動物,為保證ATⅢ基因在乳腺細胞中表達,需將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子啟動子等調(diào)控組件重組在一起。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】反轉(zhuǎn)錄;DNA連接;該細胞的全能性較高;貼壁生長;核移植;啟動子
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:2引用:1難度:0.6
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