枯草芽孢桿菌可分泌纖維素酶。研究者篩選到一株降解纖維素能力較強(qiáng)的枯草芽孢桿菌菌株（B菌），從中擴(kuò)增得到了一種纖維素酶（C1酶）基因。將獲得的C1酶基因與高效表達(dá)載體（HT質(zhì)粒）連接，再導(dǎo)入B菌，以期獲得降解纖維素能力更強(qiáng)的工程菌。
（1）C1酶基因可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增時(shí)需要根據(jù)C1酶基因的脫氧核苷酸序列C1酶基因的脫氧核苷酸序列設(shè)計(jì)引物，引物的作用是使DNA聚合酶能夠從3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從3'端開始連接脫氧核苷酸。
（2）對(duì)擴(kuò)增到的C1酶基因測(cè)序，與數(shù)據(jù)庫(kù)中的C1酶基因編碼序列相比有兩個(gè)堿基對(duì)不同，但兩者編碼出的蛋白質(zhì)的氨基酸序列相同，這是因?yàn)?!--BA-->密碼子具有簡(jiǎn)并性，堿基改變后仍然能編碼同一種氨基酸密碼子具有簡(jiǎn)并性，堿基改變后仍然能編碼同一種氨基酸。C1酶基因在DNA連接DNA連接酶的作用下可與質(zhì)粒進(jìn)行體外連接，C1酶基因能與質(zhì)粒重組并在受體細(xì)胞中表達(dá)的遺傳學(xué)基礎(chǔ)是目的基因與質(zhì)粒具有相同的組成單位和雙螺旋結(jié)構(gòu)，且不同生物所用的密碼子相同目的基因與質(zhì)粒具有相同的組成單位和雙螺旋結(jié)構(gòu)，且不同生物所用的密碼子相同。
（3）C1酶基因以B鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，轉(zhuǎn)錄時(shí)mRNA自身的延伸方向?yàn)?'→3'。為了使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質(zhì)粒連接，擴(kuò)增C1酶基因時(shí)在其兩端添加了SmaI和BamHI的酶切位點(diǎn)。該基因內(nèi)部沒有這兩種酶切位點(diǎn)。圖1中酶切位點(diǎn)1和2所對(duì)應(yīng)的酶分別是BamHⅠ、SmaⅠBamHⅠ、SmaⅠ。
（4）將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為三組，一組接種工程菌，對(duì)照組1不進(jìn)行處理，對(duì)照組2接種等量B菌或適量纖維素酶等量B菌或適量纖維素酶。在相同條件下培養(yǎng)96小時(shí)，結(jié)果如圖2，說明工程菌降解纖維素的能力最強(qiáng)。預(yù)期該工程菌在處理廢棄物及保護(hù)環(huán)境方面可能的應(yīng)用降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染。（舉一例）
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】C1酶基因的脫氧核苷酸序列；使DNA聚合酶能夠從3'端開始連接脫氧核苷酸；密碼子具有簡(jiǎn)并性，堿基改變后仍然能編碼同一種氨基酸；DNA連接；目的基因與質(zhì)粒具有相同的組成單位和雙螺旋結(jié)構(gòu)，且不同生物所用的密碼子相同；BamHⅠ、SmaⅠ；等量B菌或適量纖維素酶；降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：42引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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