新冠肺炎目前依舊是我國防疫的一個重點?？梢杂帽茄适米硬蓸舆M(jìn)行新冠病毒核酸檢測。引起該病的新冠病毒是一種新型RNA冠狀病毒。
Ⅰ.新型冠狀病毒的檢測方法分為抗體檢測和核酸檢測，核酸檢測主要采用實時熒光定量PCR（qPCR）法。qPCR法檢測新型冠狀病毒的基本過程如圖1所示，回答下列問題：
（1）PCR即多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)，該技術(shù)的原理是 DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制。PCR反應(yīng)的條件包括 Taq酶、引物Taq酶、引物、四種脫氧核苷酸、一定的緩沖液和DNA模板。PCR反應(yīng)每次循環(huán)依次經(jīng)歷 變性、復(fù)性、延伸變性、復(fù)性、延伸三個環(huán)節(jié)。
（2）滅活的新型冠狀病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為DNA的過程中，需要 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶參與。
Ⅱ.科研人員以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原，利用基因工程研制疫苗用于接種預(yù)防，簡要過程如圖2所示。回答下列問題：
（3）利用基因工程研制疫苗過程中，S蛋白基因的表達(dá)載體為質(zhì)粒，這是因為質(zhì)粒DNA分子上具有復(fù)制原點，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中可以 自我復(fù)制自我復(fù)制；質(zhì)粒上有抗生素抗性基因，該基因是質(zhì)粒中的 標(biāo)記標(biāo)記基因，作用是 鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因；質(zhì)粒上有啟動子，啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。
（4）為了驗證表達(dá)的S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可以用表達(dá)的S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進(jìn)行 抗原--抗體雜交抗原--抗體雜交實驗，如果出現(xiàn) 雜交帶雜交帶則證明表達(dá)的S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性。
【答案】DNA雙鏈復(fù)制；Taq酶、引物；變性、復(fù)性、延伸；逆轉(zhuǎn)錄；自我復(fù)制；標(biāo)記；鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因；RNA聚合酶；抗原--抗體雜交；雜交帶
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴增目的基因，還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物，突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該PCR擴增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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