（一）下列是高產(chǎn)蛋白酶的枯草芽孢桿菌的篩選過程，回答下列問題：
（1）配置脫脂牛奶固體培養(yǎng)基時脫脂牛奶需單獨(dú)用 112℃滅菌的原因是 既能將牛奶中的雜菌殺滅又不會過多破壞牛奶中的營養(yǎng)成分既能將牛奶中的雜菌殺滅又不會過多破壞牛奶中的營養(yǎng)成分，推測還可用 過濾滅菌過濾滅菌方法達(dá)到相同的目的。配置該培養(yǎng)基還需調(diào)節(jié) pH 為 中性偏堿中性偏堿。
（2）取三個不同地點(diǎn)的土樣，用無菌水稀釋。分別取 10-4、10-5、10-6 三個稀釋度涂布到篩選平板中，每個稀釋度做 3 個重復(fù)。
（3）將得到的平板 倒置倒置于 30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h。觀察平板上的菌落，用接種環(huán)挑取 透明圈大的/透明圈直徑與菌落直徑比值大透明圈大的/透明圈直徑與菌落直徑比值大的菌落中的菌種在脫脂牛奶平板上進(jìn)行劃線分離，以進(jìn)一步 分離純化分離純化。最后將分離出的單菌落接種到 AA（ A.LB 固體斜面培養(yǎng)基B.LB 固體平板培養(yǎng)基C.馬鈴薯蔗糖斜面培養(yǎng)基D.馬鈴薯蔗糖平板培養(yǎng)基）中，于 30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24 h 后，放入 4℃冰箱中保存。
（二）番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）是一類單鏈環(huán)狀 DNA 病毒，能引發(fā)番茄黃化曲葉病。檢測某番茄幼苗是否感染該病毒，實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行以下操作：①分析 PCR 擴(kuò)增結(jié)果；②從番茄幼苗組織樣本中提取 DNA；③利用 PCR 擴(kuò)增 DNA 片段；④采集番茄幼苗葉片組織樣本?；卮鹣铝袉栴}：
（1）若要得到正確的檢測結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該是 ④②③①④②③①（用數(shù)字序號表示）。
（2）步驟②在番茄研磨液中加入 2mol/L 的氯化鈉，作用是 溶解DNA溶解DNA；研磨液中的乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）的作用是 抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解。
（3）操作③中使用的酶是 Taq DNA聚合酶（耐高溫的DNA聚合酶）Taq DNA聚合酶（耐高溫的DNA聚合酶）。PCR 反應(yīng)中每次循環(huán)可分為變性、退火、延伸延伸三步。
（4）PCR 擴(kuò)增得到的產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳后的結(jié)果如圖：
注：M：DNA marker；1-4：空白對照、陰性對照、陽性對照、樣品實(shí)驗(yàn)中，DNA marker 是一組 已知長度和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA片段已知長度和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA片段的混合物，起參照作用。 健康番茄幼苗的DNA健康番茄幼苗的DNA是陰性對照組，TYLCV 的 DNA 是陽性對照組。若想利用該樣品植株獲得無病毒的番茄幼苗，方法是 取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。
【答案】既能將牛奶中的雜菌殺滅又不會過多破壞牛奶中的營養(yǎng)成分；過濾滅菌；中性偏堿；倒置；透明圈大的/透明圈直徑與菌落直徑比值大；分離純化；A；④②③①；溶解DNA；抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解；Taq DNA聚合酶（耐高溫的DNA聚合酶）；延伸；已知長度和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA片段；健康番茄幼苗的DNA；取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：8引用：1難度：0.6
相似題
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1．回答下列關(guān)于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測定．
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對其計數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數(shù)時，計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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