胚胎干細胞（ES細胞）介導法的主要操作過程是：將外源基因?qū)肱咛ジ杉毎缓髮⑥D(zhuǎn)基因的胚胎干細胞注射于受體動物胚胎后可參與受體的胚胎構成。如圖是利用胚胎干細胞介導法培育出熒光小鼠的過程?；卮鹣铝袉栴}：
（1）從水母中獲取綠色熒光蛋白基因有多種方法。將水母的全部基因用限制性內(nèi)切核酸酶切成片段，插入到載體分子中，并將所得的 重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌進行克隆保存，這些大腸桿菌的群體稱為 基因組文庫基因組文庫。
（2）②過程中用到了 限制限制酶和 DNA連接DNA連接酶，③過程常用 顯微注射顯微注射方法，⑥過程通常要對受體母鼠進行 同期發(fā)情同期發(fā)情處理后才可進行胚胎移植。
（3）關于受體母鼠妊娠產(chǎn)下的子代小鼠的特點，下列敘述正確的是 CC。
A.各細胞都有綠色熒光蛋白基因，所以全身每個細胞都有綠色熒光蛋白產(chǎn)生
B.各細胞都有綠色熒光蛋白基因，但只有部分細胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生
C.不是所有細胞都有綠色熒光蛋白基因，所以只有部分細胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生
D.該小鼠產(chǎn)生的配子中含綠色熒光蛋白基因的概率為12
1
2
【答案】重組質(zhì)粒；基因組文庫；限制；DNA連接；顯微注射；同期發(fā)情；C
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：4引用：1難度：0.7
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1．p53基因是一種抑癌基因，在惡性腫瘤患者中突變率達50%以上。與人相比，大象體內(nèi)含有多對p53基因，推測是其很少患腫瘤的主要原因。設計實驗探究人p53基因在乳腺腫瘤細胞中的作用，回答下列問題：
（1）利用PCR技術擴增p53基因。首先根據(jù)p53基因的核苷酸序列，設計并合成，其能與變性p53基因單鏈結(jié)合，在催化作用下延伸，如此循環(huán)多次。
（2）p53基因表達載體的構建。如圖所示，表達載體上除了標注的DNA片段外，在p53基因上游還必須擁有的DNA片段（箭頭所示）是，其作用機理是。外源p53基因插入載體中至少需要兩種工具酶，包括準確切割DNA的限制性核酸內(nèi)切酶和將雙鏈DNA片段“縫合”起來的。
（3）乳腺腫瘤細胞培養(yǎng)。完成倫理學審查和病人知情同意書簽署后，將患者乳腺腫瘤組織塊剪碎，制成細胞懸液在適宜的條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)環(huán)境中所需的主要氣體包括細胞代謝必需的和維持培養(yǎng)液pH值的。保持培養(yǎng)環(huán)境處于無菌無毒條件的操作包括（答出兩點即可）。
（4）檢測p53基因表達對乳腺腫瘤細胞增殖的影響。分別將空載體和p53表達載體轉(zhuǎn)入腫瘤細胞培養(yǎng)，采用特殊方法檢測細胞增殖情況，并從培養(yǎng)的腫瘤細胞中提取蛋白質(zhì)，用相應的進行雜交，檢測p53基因翻譯成蛋白質(zhì)的情況，探索雜交帶強度與細胞增殖率相關性。發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：58引用：5難度：0.6 -
2．自然界中某些細菌可通過代謝將原油轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定無害的終產(chǎn)物，科學家為獲得能有效修復原油污染土壤的工程菌展開相關研究。
（1）獲得能降解原油的目標菌可從取樣，樣品經(jīng)（無菌水/蒸餾水）稀釋后涂布于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，分離純化后獲得目標菌A。
（2）目標菌A成膜性差，不能有效控制原油向深層土壤滲透。研究人員將假單胞菌的bdlA基因（約1300bp）導入目標菌A體內(nèi)，嘗試構建成膜性好的工程菌。
①假單胞菌遭受環(huán)境壓力時，會分泌大量胞外復合物將自身包裹于其中形成細菌聚集膜樣物（生物被膜），體現(xiàn)了生物對環(huán)境的。
②圖1為bdlA基因與pX系列質(zhì)粒連接構建的重組質(zhì)粒模式圖，為初步檢測構建是否成功，可選用限制酶對其切割，并對酶切產(chǎn)物及重組質(zhì)粒進行凝膠電泳檢測，結(jié)果如圖2。據(jù)圖2可初步判斷重組質(zhì)粒構建成功，依據(jù)是。
（3）上述方法獲得的兩種工程菌命名為KT2和KT5，在不同時間測定實驗組中工程菌及對照組中的生物被膜總量相對值，結(jié)果如圖3所示。該結(jié)果表明。
（4）若要將以上工程菌用于原油污染土壤的修復，舉一例說明下一步還應進行哪些方面的研究？發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：36引用：2難度：0.6
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