四尾柵藻具有環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)和生長(zhǎng)速度快等優(yōu)點(diǎn),如果能將其進(jìn)行品種改良,提高含油量,有望解決微藻生物柴油產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程的瓶頸。研究人員利用基因工程技術(shù)將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈矕旁?,獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻,利用地?zé)釓U水培養(yǎng),不僅能生產(chǎn)生物柴油,還能治理地?zé)釓U水。操作過(guò)程如下圖,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
注:LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色。若無(wú)該基因或該基因被破壞,則菌落呈白色。
(1)將質(zhì)粒pMD19-DGAT1導(dǎo)入大腸桿菌前,通常先用Ca2+處理大腸桿菌,使細(xì)胞處于一種 能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
(2)圖中接種大腸桿菌的培養(yǎng)基pH一般為 中性或弱堿性中性或弱堿性。為了便于重組質(zhì)粒的篩選,該選擇培養(yǎng)基中應(yīng)添加 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal。導(dǎo)入 沒(méi)有連接目的基因的質(zhì)粒(或空質(zhì)粒;或pMD19質(zhì)粒)沒(méi)有連接目的基因的質(zhì)粒(或空質(zhì)粒;或pMD19質(zhì)粒)的大腸桿菌菌落成藍(lán)色,導(dǎo)入 重組質(zhì)粒(或pMD19-DGAT1質(zhì)粒)重組質(zhì)粒(或pMD19-DGAT1質(zhì)粒)的大腸桿菌菌落成白色。
(3)由上圖推測(cè),用 BamHⅠBamHⅠ和 XbaⅠXbaⅠ酶切割pMD19-DGAT1獲得 DGAT1基因,并與酶切后的載體pBI121連接再次構(gòu)建基因表達(dá)載體,用這兩種酶切割的目的是 保證其準(zhǔn)確插入質(zhì)粒并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問(wèn)題(或防止反向連接和自身環(huán)化)保證其準(zhǔn)確插入質(zhì)粒并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問(wèn)題(或防止反向連接和自身環(huán)化)。
(4)為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對(duì)地?zé)釓U水的去污能力,研究人員設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并得到相應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表。
指標(biāo) | 總氮(mg/L) | 總磷(mg/L) | 氟化物(mg/L) |
廢水培養(yǎng)基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
應(yīng)添加對(duì)照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后,檢測(cè)總氮、總磷和氟化物的含量
應(yīng)添加對(duì)照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后,檢測(cè)總氮、總磷和氟化物的含量
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子;中性或弱堿性;氨芐青霉素和X-gal;沒(méi)有連接目的基因的質(zhì)粒(或空質(zhì)粒;或pMD19質(zhì)粒);重組質(zhì)粒(或pMD19-DGAT1質(zhì)粒);BamHⅠ;XbaⅠ;保證其準(zhǔn)確插入質(zhì)粒并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問(wèn)題(或防止反向連接和自身環(huán)化);應(yīng)添加對(duì)照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后,檢測(cè)總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:32引用:2難度:0.6
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