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四尾柵藻具有環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)和生長(zhǎng)速度快等優(yōu)點(diǎn),如果能將其進(jìn)行品種改良,提高含油量,有望解決微藻生物柴油產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程的瓶頸。研究人員利用基因工程技術(shù)將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈矕旁?,獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻,利用地?zé)釓U水培養(yǎng),不僅能生產(chǎn)生物柴油,還能治理地?zé)釓U水。操作過(guò)程如下圖,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
注:LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色。若無(wú)該基因或該基因被破壞,則菌落呈白色。
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(1)將質(zhì)粒pMD19-DGAT1導(dǎo)入大腸桿菌前,通常先用Ca2+處理大腸桿菌,使細(xì)胞處于一種
能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子
能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子
的生理狀態(tài)。
(2)圖中接種大腸桿菌的培養(yǎng)基pH一般為
中性或弱堿性
中性或弱堿性
。為了便于重組質(zhì)粒的篩選,該選擇培養(yǎng)基中應(yīng)添加
氨芐青霉素和X-gal
氨芐青霉素和X-gal
。導(dǎo)入
沒(méi)有連接目的基因的質(zhì)粒(或空質(zhì)粒;或pMD19質(zhì)粒)
沒(méi)有連接目的基因的質(zhì)粒(或空質(zhì)粒;或pMD19質(zhì)粒)
的大腸桿菌菌落成藍(lán)色,導(dǎo)入
重組質(zhì)粒(或pMD19-DGAT1質(zhì)粒)
重組質(zhì)粒(或pMD19-DGAT1質(zhì)粒)
的大腸桿菌菌落成白色。
(3)由上圖推測(cè),用
BamHⅠ
BamHⅠ
XbaⅠ
XbaⅠ
酶切割pMD19-DGAT1獲得 DGAT1基因,并與酶切后的載體pBI121連接再次構(gòu)建基因表達(dá)載體,用這兩種酶切割的目的是
保證其準(zhǔn)確插入質(zhì)粒并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問(wèn)題(或防止反向連接和自身環(huán)化)
保證其準(zhǔn)確插入質(zhì)粒并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問(wèn)題(或防止反向連接和自身環(huán)化)
。
(4)為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對(duì)地?zé)釓U水的去污能力,研究人員設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并得到相應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表。
指標(biāo) 總氮(mg/L) 總磷(mg/L) 氟化物(mg/L)
廢水培養(yǎng)基 23.2 4.32 4.56
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 1.9 0.45 0.84
該實(shí)驗(yàn)不能說(shuō)明轉(zhuǎn)DGAT1基因顯著提高了四尾柵藻的去污能力。請(qǐng)進(jìn)一步完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
應(yīng)添加對(duì)照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后,檢測(cè)總氮、總磷和氟化物的含量
應(yīng)添加對(duì)照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后,檢測(cè)總氮、總磷和氟化物的含量
。

【答案】能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子;中性或弱堿性;氨芐青霉素和X-gal;沒(méi)有連接目的基因的質(zhì)粒(或空質(zhì)粒;或pMD19質(zhì)粒);重組質(zhì)粒(或pMD19-DGAT1質(zhì)粒);BamHⅠ;XbaⅠ;保證其準(zhǔn)確插入質(zhì)粒并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問(wèn)題(或防止反向連接和自身環(huán)化);應(yīng)添加對(duì)照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后,檢測(cè)總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:32引用:2難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
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    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
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    識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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