為獲得具有抗玉米螟、抗除草劑草甘膦和抗旱性狀的優(yōu)良轉(zhuǎn)基因玉米，科研人員把重組到同一植物表達(dá)載體的cry1ACM、epsps、GTA和ZmPIS轉(zhuǎn)入植株，獲得轉(zhuǎn)基因植株。其中cry1AcM是抗玉米螟基因，epsps和GAT兩個(gè)基因同時(shí)發(fā)揮作用時(shí)，能有效提高玉米植株抗御草甘膦的能力，ZmPIS是抗旱基因。通過(guò)逐代除草劑篩選、分子檢測(cè)和抗蟲(chóng)性鑒定，從大量轉(zhuǎn)基因株系中優(yōu)選出優(yōu)良玉米株系。構(gòu)建的基因表達(dá)載體部分示意圖如圖，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要的工具酶有

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

。根據(jù)基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)組成分析，pUbi和P35S是

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

，其功能是

RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行

RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行

。
（2）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入玉米受體細(xì)胞中最常用的方法是

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

，玉米細(xì)胞經(jīng)植物組培獲得植株，待植株長(zhǎng)出新葉后噴灑含

除草劑草甘膦

除草劑草甘膦

的水溶液，選取存活植株移栽到溫室，以獲得具有除草劑抗性的植株。
（3）為檢測(cè)抗旱基因是否導(dǎo)入玉米細(xì)胞，可采用

DNA分子雜交

DNA分子雜交

技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。除此之外也可采用PCR技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，在PCR反應(yīng)體系中，應(yīng)加入待測(cè)玉米細(xì)胞的

基因組DNA

基因組DNA

，抗旱基因的

2

2

種引物、dNTP等物質(zhì)，若擴(kuò)增后進(jìn)行電泳時(shí)出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，則導(dǎo)入成功。