如圖為利用基因工程生產乙肝疫苗的過程,質粒上箭頭所指部位為相應的限制酶切割位點。質粒中l(wèi)acZ基因編碼產生的酶可以分解培養(yǎng)基中的XgaⅠ,產生藍色物質,使菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落為白色。回答下列問題:
(1)利用PCR技術擴增目的基因時需要的酶為 耐高溫DNA 聚合酶耐高溫DNA 聚合酶;此過程還需要引物,其作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸,若將1個目的基因擴增n次,則需要引物 2(2n-1)2(2n-1)個。
(2)①過程為了防止目的基因與質粒任意連接,應選擇 EcoR I、BamH IEcoR I、BamH I限制酶分別切割目的基因和質粒,并將切割后的質粒和目的基因用 DNA連接DNA連接酶連接形成重組質粒,該重組質粒除了含有目的基因和標記基因外,還應含有 啟動子、終止子啟動子、終止子(寫出2點)等結構。
(3)過程②一般用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌。為了篩選成功導入重組質粒的大腸桿菌,可將大腸桿菌接種到含有 X-gal和青霉素X-gal和青霉素的固體培養(yǎng)基上,挑選顏色為 白色白色(填“藍色”或“白色”)的菌落進一步培養(yǎng)。
(4)除圖示方法外,還可利用乳腺生物反應器生產乙肝疫苗,該過程需要將目的基因與 乳腺中特異表達的基因乳腺中特異表達的基因啟動子相連,并通過 顯微注射顯微注射方法將重組質粒導入到動物的受精卵中,由這個受精卵發(fā)育成的轉基因動物進入泌乳期后,通過分泌乳汁即可獲得乙肝抗原蛋白。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】耐高溫DNA 聚合酶;使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;2(2n-1);EcoR I、BamH I;DNA連接;啟動子、終止子;Ca2+;X-gal和青霉素;白色;乳腺中特異表達的基因;顯微注射
【解答】
【點評】
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