醫(yī)學研究發(fā)現,人體肝細胞中產生的抗凝血酶Ⅲ在抗凝血、防血栓方面具有重要作用。研究人員通過培育山羊乳腺生物反應器大量生產抗凝血酶Ⅲ.請回答下列問題:
(1)應從人的肝細胞中提取并分離mRNA,逆轉錄成單鏈DNA.根據已知的抗凝血酶Ⅲ基因的堿基序列設計特異性引物引物,經PCR和電泳,可得到大量抗凝血酶Ⅲ基因,此過程所用原料為4種脫氧核苷酸4種脫氧核苷酸。
(2)重組后的人抗凝血酶Ⅲ基因表達載體由山羊β-酪蛋白基因啟動子、抗凝血酶Ⅲ基因、標記基因和終止子組成。其中山羊β-酪蛋白基因啟動子山羊β-酪蛋白基因啟動子決定了抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺細胞中特異性表達。
(3)山羊的ES細胞來自早期胚胎干細胞。在飼養(yǎng)層細胞上培養(yǎng)時,ES細胞具有只分裂不分化只分裂不分化的特性。將重組人抗凝血酶Ⅲ基因表達載體包埋在由磷脂雙分子層構成的脂質體內并轉染ES細胞時,目的基因表達載體進入ES細胞的方式為胞吞胞吞。
(4)對山羊進行同期發(fā)情和超數排卵處理,得到代孕母羊和多個卵母細胞,當卵母細胞培養(yǎng)至MⅡ中期MⅡ中期時,可去核并移入上述ES細胞的細胞核,完成核移植。為選擇雌性胚胎,可在囊胚滋養(yǎng)層滋養(yǎng)層時取細胞做DNA分析用以鑒定性別。檢測羊奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ的方法是抗原一抗體雜交抗原一抗體雜交。
【考點】體外受精和胚胎移植.
【答案】引物;4種脫氧核苷酸;山羊β-酪蛋白基因啟動子;只分裂不分化;胞吞;MⅡ中期;滋養(yǎng)層;抗原一抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:28引用:3難度:0.6