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為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶,研究人員從某種海洋細(xì)菌中利用PCR克隆了α-淀粉酶基因,利用基因工程大量制備α-淀粉酶,流程如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)科研人員利用PCR克隆α-淀粉酶基因時(shí),引物在擴(kuò)增過(guò)程中的作用是
與模板鏈結(jié)合,使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸
與模板鏈結(jié)合,使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸
。
(2)構(gòu)建重組表達(dá)載體時(shí),應(yīng)使用
T4DNA連接酶
T4DNA連接酶
(酶)“縫合”α-淀粉酶基因和表達(dá)載體。若將重組表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌,則大腸桿菌需經(jīng)Ca2+處理,使其處于一種能
吸收周圍環(huán)境中DNA分子
吸收周圍環(huán)境中DNA分子
的生理狀態(tài)。
(3)篩選分解淀粉能力強(qiáng)的工程菌時(shí),常用
稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法
(填“稀釋涂布平板法”或“平板劃線法”)進(jìn)行篩選,菌株應(yīng)接種在以淀粉為
唯一碳源
唯一碳源
的培養(yǎng)基上,篩選時(shí)并不能僅僅以降解圈的大小為觀察指標(biāo),原因可能是
菌體繁殖力不同,菌落中菌體的數(shù)量存在差異,形成的菌落大小不同
菌體繁殖力不同,菌落中菌體的數(shù)量存在差異,形成的菌落大小不同
。
(4)若對(duì)工程菌生產(chǎn)的α-淀粉酶進(jìn)行產(chǎn)品分析,還需要進(jìn)行的工作有
某些基本特性重新確定:如酶能耐受的溫度(或pH)范圍、催化反應(yīng)的最適溫度(或pH);酶活力大小的測(cè)定;建立規(guī)?;a(chǎn)時(shí)該酶的技術(shù)體系、評(píng)估生產(chǎn)成本等
某些基本特性重新確定:如酶能耐受的溫度(或pH)范圍、催化反應(yīng)的最適溫度(或pH);酶活力大小的測(cè)定;建立規(guī)?;a(chǎn)時(shí)該酶的技術(shù)體系、評(píng)估生產(chǎn)成本等
(答出1點(diǎn))。

【答案】與模板鏈結(jié)合,使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸;T4DNA連接酶;吸收周圍環(huán)境中DNA分子;稀釋涂布平板法;唯一碳源;菌體繁殖力不同,菌落中菌體的數(shù)量存在差異,形成的菌落大小不同;某些基本特性重新確定:如酶能耐受的溫度(或pH)范圍、催化反應(yīng)的最適溫度(或pH);酶活力大小的測(cè)定;建立規(guī)?;a(chǎn)時(shí)該酶的技術(shù)體系、評(píng)估生產(chǎn)成本等
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/21 8:0:9組卷:4引用:2難度:0.7
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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