禽呼腸孤病毒（ARV）對養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展造成了巨大的威脅，研制疫苗防控禽呼腸孤病毒感染是既經(jīng)濟(jì)又有效的手段。近年來，我國的ARV基因工程疫苗的研制取得了較大進(jìn)步，在該疫苗的研制過程中，σC蛋白基因成為候選基因。請回答下列問題：
（1）ARV是RNA病毒，為獲得控制σC蛋白合成的DNA片段，可以利用病毒RNA為模板合成cDNA，這一過程需要的酶是 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶，再通過 PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)的DNA片段。
（2）為了確保能準(zhǔn)確得到σC蛋白基因，在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)必須根據(jù)σC蛋白基因兩端的 （特異性）核苷酸序列（特異性）核苷酸序列來進(jìn)行。PCR過程每次循環(huán)分為3步，依次是 變性、復(fù)性、延伸變性、復(fù)性、延伸。
（3）活載體疫苗是最具發(fā)展空間的疫苗之一?？蒲腥藛T通過基因工程構(gòu)建了能表達(dá)σC蛋白基因的重組減毒沙門菌，構(gòu)建的基本流程包括四個(gè)環(huán)節(jié)：獲取σC蛋白基因； 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將σC蛋白基因?qū)霚p毒沙門菌； σC蛋白基因的檢測與鑒定σC蛋白基因的檢測與鑒定。
（4）將重組減毒沙門菌注射到雛雞體內(nèi)，重組減毒沙門菌表達(dá)的σC蛋白作為 抗原抗原引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫。為保證疫苗接種安全和效果穩(wěn)定，在應(yīng)用時(shí)需考慮疫苗接種的 劑量和接種次數(shù)劑量和接種次數(shù)。
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶；PCR；（特異性）核苷酸序列；變性、復(fù)性、延伸；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；σC蛋白基因的檢測與鑒定；抗原；劑量和接種次數(shù)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：4引用：2難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因，還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物，得到兩個(gè)常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物，突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，得到突變目的基因序列。回答下列問題：
（1）PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該P(yáng)CR擴(kuò)增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)經(jīng)過的兩個(gè)過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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