采礦污染和不當(dāng)使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘（Cd）在土壤中過量積累。利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進(jìn)行后續(xù)處理（例如，收集植物組織器官異地妥善儲(chǔ)存），可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對(duì)Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（YCF1）基因?qū)胧茉囍参?，并檢測(cè)了相關(guān)指標(biāo)?；卮鹣铝袉栴}：
（1）為獲取YCF1基因，將酵母細(xì)胞的全部DNA提取、切割后與載體連接，該過程所需要的兩種酶是

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

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（2）將DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組基因表達(dá)載體時(shí)，重組基因表達(dá)載體中含有啟動(dòng)子、標(biāo)記基因等，啟動(dòng)子的作用是

RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

，標(biāo)記基因的作用是

供重組DNA分子的篩選與鑒定

供重組DNA分子的篩選與鑒定

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（3）進(jìn)行前期研究時(shí)，將含有YCF1基因的重組基因表達(dá)載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

。研究者進(jìn)一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的不育楊樹株系，采用不育株系作為實(shí)驗(yàn)材料的目的是

防止目的基因經(jīng)花粉在自然界中的擴(kuò)散污染

防止目的基因經(jīng)花粉在自然界中的擴(kuò)散污染

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（4）將長(zhǎng)勢(shì)-致的野生型和轉(zhuǎn)基因楊樹苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后測(cè)定植株干重（圖1）及不同器官中Cd含量（圖2）。據(jù)圖1可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株對(duì)Cd具有更強(qiáng)的

耐性

耐性

（填“耐性”或“富集能力”）；據(jù)圖2可知，對(duì)轉(zhuǎn)基因植株的

莖和葉

莖和葉

進(jìn)行后續(xù)處理對(duì)于緩解土壤Cd污染最為方便有效。

（5）已知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是

YCF1可通過主動(dòng)運(yùn)輸將Cd離子運(yùn)到液泡中，提高了細(xì)胞液的濃度，有利于植株吸水

YCF1可通過主動(dòng)運(yùn)輸將Cd離子運(yùn)到液泡中，提高了細(xì)胞液的濃度，有利于植株吸水

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