某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達。某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5′末端,獲得了L1-GFP融合基因(簡稱為甲),并將其插入質(zhì)粒P0,構建了真核表達載體P1,其部分結構和酶切位點的示意圖如圖,圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。
回答下列問題:
(1)該團隊在將甲插入質(zhì)粒P0時,使用了限制酶限制酶和DNA連接DNA連接酶,質(zhì)粒P0作為運載體運載體起作用。
(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細胞后,若在該細胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄和翻譯翻譯過程。
(3)為了獲得含有甲的牛,該團隊需要做的工作包括:將能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的細胞核細胞核移入牛的去核卵母細胞去核卵母細胞中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。
(4)為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中,某同學用PCR方法進行鑒定。在鑒定時應分別以該牛不同組織細胞中的核DNA核DNA(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。
【考點】動物細胞核移植技術.
【答案】限制酶;DNA連接;運載體;轉(zhuǎn)錄;翻譯;細胞核;去核卵母細胞;核DNA
【解答】
【點評】
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