將外源多酚氧化酶基因（POT33）的同源片段與載體結(jié)合，構(gòu)建反義表達載體，通過基因工程技術(shù)導(dǎo)入馬鈴薯，產(chǎn)生的反義RNA可有效降低馬鈴薯內(nèi)源多酚氧化酶基因的表達水平，從而改善薯塊的損傷褐化現(xiàn)象，提高馬鈴薯的食用和加工品質(zhì)?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題：
（1）獲取馬鈴薯POT33基因的同源片段：根據(jù)馬鈴薯POT33基因的 核苷酸的排列順序核苷酸的排列順序設(shè)計一對特異性引物，在引物的5′端加入限制性內(nèi)切核酸酶的 識別序列識別序列以滿足目的基因連接到載體的需要，再通過PCR獲取馬鈴薯POT33基因的同源片段。
（2）構(gòu)建重組載體：用限制性內(nèi)切核酸酶分別處理 目的基因和載體目的基因和載體，處理過程中用兩種限制酶，可以防止目的基因以及載體的 自身環(huán)化自身環(huán)化，保證POT33基因同源片段與載體的反向連接，形成反義表達載體。
（3）馬鈴薯轉(zhuǎn)化、選擇及再生：以馬鈴薯無菌苗的葉片為外植體，一般可借助 農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌實現(xiàn)馬鈴薯的遺傳轉(zhuǎn)化，再將被轉(zhuǎn)化的葉片放在含抗生素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，加入的抗生素具有篩選轉(zhuǎn)化細胞和 殺滅農(nóng)桿菌殺滅農(nóng)桿菌的雙重作用；之后對脫分化形成的愈傷組織每隔適當(dāng)時間進行 繼代繼代培養(yǎng)，后可通過調(diào)控培養(yǎng)基中 植物生長調(diào)節(jié)劑和營養(yǎng)物質(zhì)的種類和濃度植物生長調(diào)節(jié)劑和營養(yǎng)物質(zhì)的種類和濃度以獲得符合要求的再生植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】核苷酸的排列順序；識別序列；目的基因和載體；自身環(huán)化；農(nóng)桿菌；殺滅農(nóng)桿菌；繼代；植物生長調(diào)節(jié)劑和營養(yǎng)物質(zhì)的種類和濃度
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：8引用：1難度：0.7
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1．紅細胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟收入。我國科研團隊研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ）
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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