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B基因存在于水稻基因組中,僅在體細(xì)胞(2n)和精子中正常表達(dá),在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響,設(shè)計(jì)了如下圖所示的實(shí)驗(yàn)來(lái)獲取能夠在卵細(xì)胞中表達(dá)B基因的轉(zhuǎn)基因植株。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:
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(1)從水稻體細(xì)胞中提取總RNA,在
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶的催化下構(gòu)建
cDNA
cDNA
文庫(kù),進(jìn)而獲得B基因編碼蛋白的序列。Luc基因是熒光素酶基因,能催化熒光素產(chǎn)生熒光。B-Luc融合基因形成過(guò)程中需要的酶是
限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
。
(2)融合基因必須連接到啟動(dòng)子和終止子之間,其中啟動(dòng)子是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的結(jié)合位點(diǎn)。圖中卡那霉素抗性基因的作用是
作為標(biāo)記基因,檢測(cè)B-Luc融合基因是否導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞
作為標(biāo)記基因,檢測(cè)B-Luc融合基因是否導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞
。
(3)過(guò)程①最常用的方法是
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
;若借助Luc基因的表達(dá)產(chǎn)物來(lái)完成圖中第二次鑒定篩選,則具體方法是
檢測(cè)加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
檢測(cè)加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光

(4)從轉(zhuǎn)基因水稻植株未成熟種子中分離出胚,觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含一個(gè)染色體組,判定該胚是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的,而一般情況下水稻卵細(xì)胞在未受精時(shí)不進(jìn)行發(fā)育,由此表明
B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚
B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚
。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄;cDNA;限制酶和DNA連接酶;RNA聚合酶;作為標(biāo)記基因,檢測(cè)B-Luc融合基因是否導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;檢測(cè)加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光;B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:3引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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