非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物作為腦卒中模型動(dòng)物,在腦結(jié)構(gòu)和生理上與人類更接近,可提供較常規(guī)嚙齒類模型更多的科學(xué)價(jià)值。傳統(tǒng)的非人靈長(zhǎng)類腦疾病動(dòng)物模型在研究中經(jīng)常出現(xiàn)操作困難、編輯基因脫靶等問(wèn)題。對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的體細(xì)胞進(jìn)行基因編輯,獲得陽(yáng)性克隆的細(xì)胞,利用體細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建的動(dòng)物疾病模型具有優(yōu)勢(shì)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)基因編輯系統(tǒng)由sgRNA和Cas9蛋白組成,當(dāng)sgRNA與靶DNA上某些序列發(fā)生局部互補(bǔ)結(jié)合時(shí),Cas9蛋白就可以切割DNA。該系統(tǒng)和限制酶都是切割DNA的工具,二者作用的共同特點(diǎn)是 都能夠識(shí)別DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開(kāi)都能夠識(shí)別DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。sgRNA的識(shí)別序列越短,基因編輯的脫靶率越高,請(qǐng)分析原因:sgRNA的識(shí)別序列短,特異性差,容易與其他片段結(jié)合而造成編輯出錯(cuò)sgRNA的識(shí)別序列短,特異性差,容易與其他片段結(jié)合而造成編輯出錯(cuò)。
(2)將經(jīng)基因編輯的單個(gè)體細(xì)胞注入 MⅡ期MⅡ期(填時(shí)期)的去核的卵母細(xì)胞中,去核的目的是 使核移植動(dòng)物模型的核遺傳物質(zhì)全部來(lái)自經(jīng)基因編輯的單個(gè)體細(xì)胞使核移植動(dòng)物模型的核遺傳物質(zhì)全部來(lái)自經(jīng)基因編輯的單個(gè)體細(xì)胞。
(3)用電融合法使兩細(xì)胞融合形成重構(gòu)胚,用電刺激、蛋白酶合成抑制劑等方法激活重構(gòu)胚,使其完成 細(xì)胞分裂和發(fā)育細(xì)胞分裂和發(fā)育過(guò)程。重構(gòu)胚必須移植到 同種、生理狀態(tài)相同同種、生理狀態(tài)相同的雌性個(gè)體中才能繼續(xù)發(fā)育。
(4)為獲得更多基因編輯動(dòng)物模型,可在胚胎移植前對(duì)胚胎進(jìn)行 胚胎分割胚胎分割?;蚓庉媱?dòng)物模型的遺傳背景保持相同,其優(yōu)點(diǎn)是 有利于減少實(shí)驗(yàn)誤差(或克隆動(dòng)物能減少個(gè)體差異的影響)有利于減少實(shí)驗(yàn)誤差(或克隆動(dòng)物能減少個(gè)體差異的影響)。
【答案】都能夠識(shí)別DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開(kāi);sgRNA的識(shí)別序列短,特異性差,容易與其他片段結(jié)合而造成編輯出錯(cuò);MⅡ期;使核移植動(dòng)物模型的核遺傳物質(zhì)全部來(lái)自經(jīng)基因編輯的單個(gè)體細(xì)胞;細(xì)胞分裂和發(fā)育;同種、生理狀態(tài)相同;胚胎分割;有利于減少實(shí)驗(yàn)誤差(或克隆動(dòng)物能減少個(gè)體差異的影響)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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