人乳鐵蛋白(hLF)對細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究,主要流程如圖。RT-PCR過程需先進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成DNA,然后再進(jìn)行PCR。圖中AseI、NheI、SalI、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點,neor為新霉素抗性基因,BLG基因為B乳鐵蛋白基因,GFP基因為綠色熒光蛋白基因。回答下列問題:
(1)過程①中用到的酶是 逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶,經(jīng)過程①得到的hLH基因不具有的結(jié)構(gòu)是 啟動子、終止子、內(nèi)含子啟動子、終止子、內(nèi)含子(至少答出2個)。
(2)過程②需要用 SalⅠ和BamHⅠSalⅠ和BamHⅠ酶處理pEB質(zhì)粒和添加了相應(yīng)識別序列的hLH基因,已獲得重組質(zhì)粒。
(3)過程②中,hLF基因插入到BLG基因之后的目的是 使hLF基因在山羊乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)(或使目的基因表達(dá))使hLF基因在山羊乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)(或使目的基因表達(dá))。GFP基因的作用是 用于篩選成功導(dǎo)入hLF基因的乳腺細(xì)胞用于篩選成功導(dǎo)入hLF基因的乳腺細(xì)胞。
(4)過程③中用到的脂質(zhì)體是由磷脂分子構(gòu)成的,脂質(zhì)體介導(dǎo)利用的原理是 膜的流動性膜的流動性。若要將hLF基因?qū)胫参锛?xì)胞中表達(dá),可采用的方法有 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法(答2種)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶;啟動子、終止子、內(nèi)含子;SalⅠ和BamHⅠ;使hLF基因在山羊乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)(或使目的基因表達(dá));用于篩選成功導(dǎo)入hLF基因的乳腺細(xì)胞;膜的流動性;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/8/9 8:0:9組卷:1引用:2難度:0.5
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(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
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