重組PCR技術(shù)是一項(xiàng)新的PCR技術(shù),通過重組PCR技術(shù)能將兩個不同的DNA連接成為一個新DNA分子。某科研小組從豬源大腸桿菌中擴(kuò)增得到LTB和ST1兩個基因片段,利用重組PCR技術(shù)構(gòu)建了LTB—ST1融合基因,制備過程如圖1所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過程中,向反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)除了引物和模板鏈外,還需要加入 耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸(或Taq酶和dNTP)耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸(或Taq酶和dNTP)。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,依據(jù)的生物學(xué)原理是 DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制。
(2)從P2、P3兩種引物的角度分析,LTB和ST1基因能夠融合的關(guān)鍵是 這兩種引物的部分區(qū)域能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對這兩種引物的部分區(qū)域能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對。PCR1和PCR2不能在同一個反應(yīng)體系中進(jìn)行,原因是 P2和P3能結(jié)合,會干擾引物和模板鏈的結(jié)合,影響PCR過程P2和P3能結(jié)合,會干擾引物和模板鏈的結(jié)合,影響PCR過程。②過程不需要加入引物,原因是 兩條母鏈可作為合成子鏈的引物兩條母鏈可作為合成子鏈的引物。
(3)科研小組為了檢測是否成功構(gòu)建出融合基因,將反應(yīng)后體系中的各種DNA分子進(jìn)行電泳,結(jié)果如圖2所示。則融合基因最可能是 33,判斷依據(jù)是 融合基因包含2個不同的基因,其分子量較大,3表示的DNA分子量最大(或1和2與M中堿基對數(shù)為1000bp和2500bp的對照基因的電泳結(jié)果相同,3的堿基對數(shù)大約是1和2的堿基對數(shù)之和)融合基因包含2個不同的基因,其分子量較大,3表示的DNA分子量最大(或1和2與M中堿基對數(shù)為1000bp和2500bp的對照基因的電泳結(jié)果相同,3的堿基對數(shù)大約是1和2的堿基對數(shù)之和)。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸(或Taq酶和dNTP);DNA雙鏈復(fù)制;這兩種引物的部分區(qū)域能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對;P2和P3能結(jié)合,會干擾引物和模板鏈的結(jié)合,影響PCR過程;兩條母鏈可作為合成子鏈的引物;3;融合基因包含2個不同的基因,其分子量較大,3表示的DNA分子量最大(或1和2與M中堿基對數(shù)為1000bp和2500bp的對照基因的電泳結(jié)果相同,3的堿基對數(shù)大約是1和2的堿基對數(shù)之和)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/30 13:42:58組卷:17引用:2難度:0.5
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