非洲豬瘟是由ASFV（一種雙鏈DNA病毒）感染豬引起的烈性傳染病。某研究小組將ASFV外殼蛋白基因?qū)胴i體細(xì)胞中，利用核移植技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因克隆豬，從而得到自動產(chǎn)生ASFV抗體的個體。其過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）圖中步驟①采用的技術(shù)手段是

細(xì)胞核移植

細(xì)胞核移植

，結(jié)構(gòu)乙處于胚胎發(fā)育過程的

囊胚

囊胚

期，進行步驟③時，受體C豬子宮對外來胚胎基本上

不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

，從而為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。
（2）B豬體細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)時，陳必須保證環(huán)境是無菌、無毒外，還必須定期

更換培養(yǎng)液

更換培養(yǎng)液

，以防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成的傷害。培養(yǎng)到一定程度后，需要分瓶再繼續(xù)培養(yǎng)，分瓶后的培養(yǎng)過程稱為

傳代培養(yǎng)

傳代培養(yǎng)

。
（3）由于目的基因不能直接導(dǎo)入受體細(xì)胞，內(nèi)此需要構(gòu)建

基因表達載體

基因表達載體

，該過程采用雙酶切法處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，其優(yōu)點是

保證目的基因和載體定向連接

保證目的基因和載體定向連接

。
（4）利用抗原—抗體雜交技術(shù)判斷D豬是否產(chǎn)生ASFV抗體，使用的抗原物質(zhì)最好是

ASFV外殼蛋白

ASFV外殼蛋白

。該抗體也可以使用雜交瘤技術(shù)來制備，通常情況下，雜交瘤細(xì)胞是由骨髓瘤細(xì)胞和

經(jīng)ASFV外殼蛋白免疫后的B淋巴

經(jīng)ASFV外殼蛋白免疫后的B淋巴

細(xì)胞融合獲得的。