普通PCR在擴(kuò)增DNA的過(guò)程中存在一定概率的堿基錯(cuò)誤配對(duì)，得到部分的錯(cuò)誤產(chǎn)物。巢式PCR是一種在普通PCR基礎(chǔ)上改良的新型PCR技術(shù)，擴(kuò)增的精確性比普通PCR更高。巢式PCR對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)需要用到兩對(duì)不同的引物，首先使用第一對(duì)引物（外引物）對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行第一次擴(kuò)增得到中間產(chǎn)物，然后使用第二對(duì)引物（內(nèi)引物）對(duì)中間產(chǎn)物進(jìn)行第二次擴(kuò)增得到目標(biāo)產(chǎn)物，過(guò)程如圖所示。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）PCR的原理是

DNA的復(fù)制

DNA的復(fù)制

，PCR反應(yīng)體系一般都需要加入一定量的，其作用是

激活DNA聚合酶

激活DNA聚合酶

。
（2）巢式PCR通常在第一支試管中進(jìn)行第一次擴(kuò)增，然后把得到的中間產(chǎn)物分離出來(lái)轉(zhuǎn)移到另外一支試管中進(jìn)行第二次擴(kuò)增反應(yīng)，兩次擴(kuò)增不在同一支試管中擴(kuò)增的原因是

防止內(nèi)引物直接參與第一次的擴(kuò)增，無(wú)法實(shí)現(xiàn)巢式PCR高精確性擴(kuò)增的目的

防止內(nèi)引物直接參與第一次的擴(kuò)增，無(wú)法實(shí)現(xiàn)巢式PCR高精確性擴(kuò)增的目的

。使用瓊脂糖凝膠電泳對(duì)模板DNA與中間產(chǎn)物分離時(shí)，由于中間產(chǎn)物的分子量較小，所以相同時(shí)間內(nèi)在凝膠中的遷移距離更

大

大

。
（3）如果巢式PCR第一次擴(kuò)增得到的某中間產(chǎn)物的部分堿基發(fā)生了替換，則第二次擴(kuò)增時(shí)內(nèi)引物與該中間產(chǎn)物配對(duì)并擴(kuò)增的概率

降低

降低

。如果想進(jìn)一步減少錯(cuò)誤目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)生，還可以適當(dāng)

提高

提高

（填“提高”或“降低”）復(fù)性的溫度。