黃萎病是一種危害棉花種植的常見疾病，科學家通過基因工程技術將抗黃萎病基因——葡萄糖氧化酶基因（GO）導入棉花，獲得抗黃萎病棉花。已知T-DNA上的基因在農(nóng)桿菌中不表達，在植物細胞中可以表達。
（1）構建上圖所示重組Ti質(zhì)粒，需要的工具酶有 限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶。將重組Ti質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌后，將農(nóng)桿菌接種到含 卡那霉素卡那霉素的LB液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)。
注：草丁磷為一種除草劑
（2）切取經(jīng)無菌培養(yǎng)的棉花幼苗的下胚軸，直接轉(zhuǎn)入菌液中侵染5～10min后，將下胚軸放入愈傷組織誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)2天。2天后，向培養(yǎng)基中加入適量 草丁磷草丁磷和青霉素，其目的分別是篩選出轉(zhuǎn)化成功的棉花細胞和 抑制農(nóng)桿菌生長抑制農(nóng)桿菌生長。
（3）將所得愈傷組織接種到適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng)誘導形成胚狀體，在適宜人工條件下繼續(xù)發(fā)育成棉花幼苗，檢測棉花細胞是否合成 葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶，選出抗黃萎病棉花。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶；卡那霉素；草丁磷；抑制農(nóng)桿菌生長；葡萄糖氧化酶
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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