新冠病毒主蛋白酶（Mpro）可識別并切割新冠病毒的多聚蛋白質(zhì)，以調(diào)節(jié)新冠病毒RNA的復(fù)制。研究發(fā)現(xiàn)Mpro在進化上高度保守，且人類缺乏其同源蛋白酶。實驗小組將新冠病毒的Mpro基因連接到pET-28a載體中構(gòu)建重組質(zhì)粒，再將其轉(zhuǎn)化到大腸桿菌細胞中，以獲得純化的Mpro,并將純化的Mpro作為抗原免疫小鼠獲得抗Mpro單克隆抗體，為研究Mpro的免疫學(xué)功能奠定基礎(chǔ)?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得的新冠病毒的Mpro基因需先經(jīng) 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程獲得相應(yīng)的DNA片段，再通過 PCRPCR技術(shù)體外擴增DNA分子，體外擴增DNA分子過程中，每一個循環(huán)需要經(jīng)過 變性、復(fù)性和延伸變性、復(fù)性和延伸三個階段。
（2）實驗小組在Mpro基因序列的兩端分別加入NdeⅠ和XhoⅠ酶切位點，再利用雙酶切法將Mpro基因連接到pET-28a載體中，NdeⅠ和XhoⅠ酶的作用是將特定部位的兩個核苷酸之間的 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵斷開，利用雙酶切法構(gòu)建基因表達載體的目的是 防止目的基因和載體的自身環(huán)化及反向連接防止目的基因和載體的自身環(huán)化及反向連接。
（3）純化的Mpro作為抗原免疫小鼠獲得抗Mpro單克隆抗體過程需要經(jīng)過兩次篩選，兩次篩選方法分別為 選擇性培養(yǎng)基進行篩選和專一抗體檢測選擇性培養(yǎng)基進行篩選和專一抗體檢測。單克隆抗體的主要優(yōu)點在于 特異性強、靈敏度高，并可大量制備特異性強、靈敏度高，并可大量制備。
（4）已知新冠病毒含有多種抗原，且目前已出現(xiàn)了多種新冠病毒變異株。據(jù)題分析，為研發(fā)治療新冠病毒的靶向藥物，選擇Mpro作為抗原制備抗Mpro單克隆抗體的原因是 Mpro在進化上高度保守，受病毒變異的影響較小，且人類缺乏其同源蛋白酶，不會受人類自身酶的影響Mpro在進化上高度保守，受病毒變異的影響較小，且人類缺乏其同源蛋白酶，不會受人類自身酶的影響。
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；PCR；變性、復(fù)性和延伸；磷酸二酯鍵；防止目的基因和載體的自身環(huán)化及反向連接；選擇性培養(yǎng)基進行篩選和專一抗體檢測；特異性強、靈敏度高，并可大量制備；Mpro在進化上高度保守，受病毒變異的影響較小，且人類缺乏其同源蛋白酶，不會受人類自身酶的影響
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：2引用：2難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：7引用：3難度：0.6 -
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（1）與植物體細胞雜交相比，圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是，過程②選用的骨髓瘤細胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長。
（2）對③篩選出的雜交瘤細胞，還需進行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點是（答出一點）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細胞。體外培養(yǎng)到一定時期的單克隆雜交—雜交瘤細胞會因為、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進行傳代培養(yǎng)。
（4）與直接使用長春堿相比，將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對人體的副作用更小，原因是。發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：21引用：4難度：0.5 -
3．使用高效的細胞毒素藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞但細胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用?？贵w一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細胞毒素）三部分組成，它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7