回答下列微生物與生物工程有關的問題
（1）基因工程的第一步是獲取目的基因。某科研工作者欲將人的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌，從而去獲取更多的胰島素。該科研工作者先從人體胰島B細胞中獲取胰島素mRNA，然后再通過逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程去獲得胰島素基因即目的基因。
（2）基因工程的第二步是將目的基因和運載體進行重組。此時，需要選擇合適的限制酶
和DNA連接DNA連接酶。常用的運載體是細菌質(zhì)粒（如圖1所示），質(zhì)粒中ori為質(zhì)粒復制所必需的DNA序列，啟動子是使轉(zhuǎn)錄開始的一段DNA序列，終止子是提供轉(zhuǎn)錄終止信號的DNA序列。青霉素抗性基因作為
標記標記基因，以便于篩選。質(zhì)粒上還有多種限制酶的切點，若目的基因上也有相應限制酶切點，為避免自身環(huán)化并確保目的基因與圖中質(zhì)粒準確重組，可選用的限制酶是BB。
A．NdeI和XbaI B．NdeI和BamHI
C．XbaI D．PstI E．BamHI
（3）基因工程的第四步是篩選導入重組質(zhì)粒的受體細胞。
①作為受體大腸桿菌不應含有青霉素抗性基因，原因是若含有則會干擾篩選若含有則會干擾篩選。
②用培養(yǎng)基篩選導入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌，制備時除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外還應加入物質(zhì)應包括BDBD（多選）
A．細胞分裂素 B．瓊脂 C．噬菌體 D．青霉素
③培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是先調(diào)節(jié)pH后滅菌先調(diào)節(jié)pH后滅菌。檢測該菌的數(shù)量可采用稀釋涂布平板法計數(shù)，用該法接種培養(yǎng)后可得到圖2中BB（A/B）所示的結(jié)果。
（4）假如基因工程改造的是細菌規(guī)?；a(chǎn)并提純分泌型脂肪酶，需要加入硫酸銨使酶蛋白與其他雜質(zhì)分離，這屬于酶分離提純步驟中的沉淀沉淀。為了便于重復使用，制得的脂肪酶往往要固定化。圖3為固定化與非固定化脂肪酶的相對酶活性與溫度的關系，比較圖18的兩條曲線，寫出固定化酶的優(yōu)勢是在30℃以上的較高溫度下也有較高的酶活性在30℃以上的較高溫度下也有較高的酶活性，劣勢是在20-30℃之間固定化酶的活性比較低在20-30℃之間固定化酶的活性比較低。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；DNA連接；標記；B；若含有則會干擾篩選；BD；先調(diào)節(jié)pH后滅菌；B；沉淀；在30℃以上的較高溫度下也有較高的酶活性；在20-30℃之間固定化酶的活性比較低
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：113引用：2難度：0.1
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2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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