p53基因是人體內(nèi)一種抑癌基因．該基因編碼的p53蛋白可對(duì)癌變前的DNA損傷進(jìn)行修復(fù)，使其恢復(fù)正常，或誘導(dǎo)其進(jìn)入休眠狀態(tài)或細(xì)胞凋亡，阻止細(xì)胞癌變．“今又生”是我國(guó)首創(chuàng)的基因治療藥物之一，是世界首個(gè)獲準(zhǔn)上市的基因治療藥物，其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼裝得到的重組病毒．“今又生”藥物中的腺病毒經(jīng)基因工程改造后，在宿主細(xì)胞內(nèi)不能復(fù)制，不能整合到染色體上．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）將p53基因與腺病毒拼裝成重組病毒，需要用到的工具酶有

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

．常用的基因工程載體除動(dòng)植物病毒外，還有

質(zhì)粒和λ噬菌體衍生物等

質(zhì)粒和λ噬菌體衍生物等

．
（2）限制酶能將特定序列的核苷酸之間的

磷酸二酯

磷酸二酯

鍵切開(kāi)，形成

黏性末端或平

黏性末端或平

末端．
（3）在“今義生”的生產(chǎn)中，科學(xué)家選擇性地放棄了一般載體都應(yīng)該具有的

復(fù)制原點(diǎn)

復(fù)制原點(diǎn)

，以獲得更高的安全性能．p53基因應(yīng)插入載體的

啟動(dòng)子和終止子

啟動(dòng)子和終止子

之間，以便于基因的表達(dá)．
（4）p53基因的大量擴(kuò)增可以采用PCR技術(shù)，該技術(shù)中需使用的一種特殊的酶是

Taq酶

Taq酶

．如圖是需要擴(kuò)增的p53基因在DNA中的位置示意圖，擴(kuò)增過(guò)程需要

2

2

種引物．n次循環(huán)之后，只含目的基因的片段占所有擴(kuò)增產(chǎn)物的比例為

2

n

-

2

n

2

n

2

n

-

2

n

2

n

．