CAR-T細胞是利用基因工程制備的一種T細胞,其表面的嵌合抗原受體(簡稱CAR)能直接識別腫瘤細胞的特異性靶抗原(如CD19)。研究人員嘗試用CAR-T免疫療法治療某種B細胞淋巴瘤(簡稱MCL)。請回答問題:
(1)正常的B細胞在體液體液免疫中識別抗原并接受T細胞產生的淋巴因子淋巴因子刺激后增殖分化為漿細胞,產生大量抗體。在致癌因子的作用下,B細胞由于遺傳物質發(fā)生變化而轉化為具有無限增殖增殖能力的癌細胞,造成免疫功能受損。
(2)如圖為研究人員制備的CAR-T細胞特異性識別MCL細胞的示意圖。
把特異性識別CD19CD19的抗體基因及胞內傳導信號分子基因等串聯在一起獲得融合基因,將其與特定病毒構建成基因表達載體基因表達載體,導入體外培養(yǎng)的人T細胞中得到CD19-CAR-T細胞。提取該細胞中的RNARNA分子,經逆轉錄后進行PCR擴增,以檢測融合基因的表達。
(3)為研究CD19-CAR-T細胞對MCL細胞的殺傷效果,進行了如下實驗:
①選取4種腫瘤細胞,每種各收集3管。將兩種T細胞分別與腫瘤細胞共培養(yǎng)12小時后,統(tǒng)計各組腫瘤細胞數(用C表示),并計算殺傷率,結果如表所示。
組別 | 殺傷率/% | ||
CD19-CAR-T細胞 | 未被修飾的丁細胞 | ||
有CD19的腫瘤細胞 | Rec-1 | 60 | 17 |
Maver-1 | 75 | 32 | |
Jeko-1 | 78 | 30 | |
無CD19的腫瘤細胞 | 24 | 13 |
(
C
對照組
-
C
實驗組
)
C
對照組
不與T細胞共培養(yǎng)的腫瘤細胞
不與T細胞共培養(yǎng)的腫瘤細胞
。上述結果表明CD19-CAR-T細胞對腫瘤細胞的殺傷效果強于未被修飾的T細胞;CD19-CAR-T細胞對有CD19的腫瘤細胞的殺傷效果強于無CD19的腫瘤細胞
CD19-CAR-T細胞對腫瘤細胞的殺傷效果強于未被修飾的T細胞;CD19-CAR-T細胞對有CD19的腫瘤細胞的殺傷效果強于無CD19的腫瘤細胞
。②研究人員欲進一步探究CD19-CAR-T細胞對腫瘤細胞殺傷的機理,已知IL-2、TNF-α是兩種殺傷性細胞因子。請在下表中的空白處填寫相應內容,完成實驗方案。
組別 | 丁細胞種類 | 腫瘤細胞種類 | IL-2的釋放量 | TNF-α 的釋放量 |
甲 | CD19-CAR-T細胞 | ⅰ 無CD19的腫瘤細胞 無CD19的腫瘤細胞 | 1.89% | 0.2% |
乙 | ⅱ CD19-CAR-T細胞 CD19-CAR-T細胞 | 有CD19的腫瘤細胞 | 30.1% | 32.49% |
(4)在上述實驗的基礎上,欲將CAR-T免疫療法用于臨床上MCL患者的治療,還需要進行哪些方面的研究?
在動物體內進行免疫治療實驗,檢測對MCL的治療效果;評估CD19-CAR-T細胞對動物體主要組織器官和正常細胞的毒理作用
在動物體內進行免疫治療實驗,檢測對MCL的治療效果;評估CD19-CAR-T細胞對動物體主要組織器官和正常細胞的毒理作用
(寫出一個方面即可)。【考點】體液免疫和細胞免疫的協(xié)調配合.
【答案】體液;淋巴因子;增殖;CD19;基因表達載體;RNA;不與T細胞共培養(yǎng)的腫瘤細胞;CD19-CAR-T細胞對腫瘤細胞的殺傷效果強于未被修飾的T細胞;CD19-CAR-T細胞對有CD19的腫瘤細胞的殺傷效果強于無CD19的腫瘤細胞;無CD19的腫瘤細胞;CD19-CAR-T細胞;在動物體內進行免疫治療實驗,檢測對MCL的治療效果;評估CD19-CAR-T細胞對動物體主要組織器官和正常細胞的毒理作用
【解答】
【點評】
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