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目的基因在酵母菌細胞中表達出的蛋白可能被細胞內(nèi)的蛋白酶降解,某科研團隊構(gòu)建重組表達載體解決了此問題。如圖為該重組表達載體構(gòu)建示意圖,圖中改造了的目的基因序列融合了信號肽的核酸序列S和2個合成的核酸序列Z,信號肽能引導融合蛋白出胞,折疊后的Z肽段能與抗體IgG結(jié)合。請據(jù)圖回答有關(guān)問題:

(1)Ori是基因組的復制起始序列,是
解旋
解旋
酶的作用位點,該序列富含
A-T
A-T
堿基對利于解旋。
(2)Plac啟動子序列,是
RNA聚合
RNA聚合
酶的作用位點,轉(zhuǎn)錄沿DNA模板鏈的
3′→5′端
3′→5′端
方向進行。
(3)雙酶切是構(gòu)建表達載體的重要環(huán)節(jié),下列關(guān)于雙酶切的敘述正確的是
AC
AC
。
A.目的基因內(nèi)不能含有所選的酶切位點
B.2個酶切位點距離越近酶切效果越佳
C.若2種限制酶最適溫度相差較大,應(yīng)實行2次單酶切
D.確保酶切位點一個產(chǎn)生黏性末端另一個產(chǎn)生平末端,方可避免載體自連
(4)為使目的基因能定向插入載體,需對目的基因進行改造,通常的做法是
設(shè)計P1、P2引物時在其5′端接上不同的酶切位點
設(shè)計P1、P2引物時在其5′端接上不同的酶切位點
。檢驗表達載體是否已經(jīng)準確連接了目的基因,需對擴增的表達載體再次雙酶切處理,完全酶切后經(jīng)電泳處理,理想的結(jié)果有
2
2
條條帶。目的基因進入受體細胞后,可能存在的復制形式有
隨載體進行復制;整合到染色體DNA上,隨染色體一起復制
隨載體進行復制;整合到染色體DNA上,隨染色體一起復制

(5)菌種選育成功后,生產(chǎn)實踐中可用含有
IgG
IgG
的瓊脂糖層析柱純化融合蛋白。

【答案】解旋;A-T;RNA聚合;3′→5′端;AC;設(shè)計P1、P2引物時在其5′端接上不同的酶切位點;2;隨載體進行復制;整合到染色體DNA上,隨染色體一起復制;IgG
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:13引用:2難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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