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如下是基因工程的基本操作步驟,請回答下列問題:
①目的基因的獲取→②→③將目的基因?qū)胧荏w細胞→④目的基因的檢測與鑒定
(1)欲從一個完整的DNA中獲取某目的基因,需要用到
限制性核酸內(nèi)切(或限制)
限制性核酸內(nèi)切(或限制)
酶進行切割。再利用PCR技術(shù)擴增目的基因,若該目的基因擴增n代,則產(chǎn)生的子代DNA分子中含有新加入引物的單鏈有
2n+1-2
2n+1-2
條。
(2)步驟②為
基因表達載體的構(gòu)建
基因表達載體的構(gòu)建
,其是基因工程的核心。若通過步驟②獲得如圖所示結(jié)構(gòu),其中抗氨芐青霉素基因的作用是
鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來
鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來
。
(3)將目的基因?qū)氪竽c桿菌,常用Ca2+處理大腸桿菌,使其成為
感受態(tài)
感受態(tài)
細胞。采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛毎仨毾葘⒛康幕驅(qū)隩i質(zhì)粒的T-DNA內(nèi),原因是T-DNA具有
可轉(zhuǎn)移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上
可轉(zhuǎn)移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上
的特點。
(4)步驟④中首先要檢測
轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因
轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因
,這是目的基因能否在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵,為檢測目的基因在轉(zhuǎn)基因生物中是否成功表達,可采用
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
技術(shù)。

【答案】限制性核酸內(nèi)切(或限制);2n+1-2;基因表達載體的構(gòu)建;鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來;感受態(tài);可轉(zhuǎn)移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上;轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因;抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:6引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     

    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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