如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，簡捷地分析出圖中片段F已知序列兩側的未知序列，具體流程如圖（以EoRI酶切為例），請據(jù)圖回答下列問題：
請據(jù)圖回答問題：
（1）步驟I用的EcoR I是一種 限制性核酸內切（或限制）限制性核酸內切（或限制）酶，它通過識別 雙鏈DNA雙鏈DNA（填“雙鏈DNA”或“RNA”）分子的特定的核苷酸序列，并且在特定位點進行切割。
（2）步驟Ⅱ連接，用的DNA連接酶催化相鄰核苷酸之間的3′一羥基與5′—磷酸基團間形成 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵鍵；PCR循環(huán)中，升溫到90℃以上是為了獲得DNA單鏈，復性后延伸，延伸時TaqDNA聚合酶的作用是催化 脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵。
（3）若下表所列為已知的DNA序列和設計的一些PCR引物，步驟Ⅲ擴增，選用的PCR引物必須是 ②④②④（從引物①②③④中選擇，填編號）。
| 已知序列 | DNA序列（虛線處省略了部分核酸序列） |
| PCR引物 | ①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′ ②5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′ ③5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′ ④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′ |
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制性核酸內切（或限制）；雙鏈DNA；磷酸二酯鍵；脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵；②④
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：1難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6