MAP30蛋白是一種能使Ⅰ型核酸核糖體失活的蛋白質(zhì),存在于苦瓜果實和種子中。實驗表明,MAP30蛋白具有抗腫瘤、抗菌、抗病毒等功能,近年來引起人們的廣泛關(guān)注。現(xiàn)有一科研團隊欲培育高效表達該基因的馬鈴薯新品種。請回答下列問題。
(1)獲取MAP30蛋白基因,人們可從 苦瓜果實或種子苦瓜果實或種子提取mRNA,再進行逆轉(zhuǎn)錄獲得。這樣得到的基因和從基因組文庫中獲取的基因的區(qū)別主要是其不含 內(nèi)含子、啟動子、終止子等內(nèi)含子、啟動子、終止子等。
(2)獲得目的基因后可利用PCR技術(shù)對其進行擴增,所用的緩沖液中除目的基因外,還應(yīng)包括 4種脫氧(核糖)核苷酸、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)4種脫氧(核糖)核苷酸、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)等物質(zhì)。
(3)構(gòu)建基因表達載體時,人們常常分別使用兩種限制酶剪切目的基因和運載體,這樣做是為了避免出現(xiàn) 目的基因自我環(huán)化、目的基因在運載體上反向連接目的基因自我環(huán)化、目的基因在運載體上反向連接。
(4)將基因表達載體導入馬鈴薯受體細胞后,可用 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)得到轉(zhuǎn)基因幼苗。檢測MAP30的基因是否成功表達,可用 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交技術(shù)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】苦瓜果實或種子;內(nèi)含子、啟動子、終止子等;4種脫氧(核糖)核苷酸、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);目的基因自我環(huán)化、目的基因在運載體上反向連接;植物組織培養(yǎng);抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:2難度:0.7
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