白羊草是一種耐旱的優(yōu)良草本植物。研究人員提取白羊草細(xì)胞中的M基因,將其轉(zhuǎn)入擬南芥細(xì)胞中,以研究白羊草的M基因與抗旱性的相關(guān)性。請(qǐng)回答下列問題:
(1)利用PCR技術(shù)獲得M基因,需要在PCR反應(yīng)體系中加入模板、引物及 熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)和原料(dNTP)熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)和原料(dNTP);若模板雙鏈DNA的數(shù)量為a個(gè),經(jīng)過35個(gè)循環(huán)需要消耗引物的數(shù)量是 a×(236-2)a×(236-2)。
(2)下面是對(duì)M基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)用到的兩種引物:
引物1:5'-ACGGTGCATTTTCATCGTCTCT-3'
引物2:5'-AGAGACGATGTTGCTTCCTCTA-3'
如圖1表示含有M基因的DNA片段,①②③④表示引物可能的結(jié)合位點(diǎn)。
下列選項(xiàng)中,引物1和引物2結(jié)合的正確位置是 DD。
A.引物1結(jié)合在②,引物2結(jié)合在③
B.引物1結(jié)合在④,引物2結(jié)合在①
C.引物1結(jié)合在③,引物2結(jié)合在②
D.引物1結(jié)合在①,引物2結(jié)合在④
(3)研究人員選擇如圖2質(zhì)粒作為運(yùn)載體時(shí),最好同時(shí)使用兩種限制酶切割質(zhì)粒,并且兩種限制酶中不能用限制酶 II,原因是 因?yàn)橄拗泼窱存在于四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因這兩種標(biāo)記基因內(nèi)部,若使用限制酶I會(huì)將兩種標(biāo)記基因都破壞因?yàn)橄拗泼窱存在于四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因這兩種標(biāo)記基因內(nèi)部,若使用限制酶I會(huì)將兩種標(biāo)記基因都破壞。
(4)研究人員想要進(jìn)一步確定白羊草的M基因與其抗旱性是否有關(guān),請(qǐng)以轉(zhuǎn)基因擬南芥、野生型擬南芥為實(shí)驗(yàn)材料,寫出簡(jiǎn)要的設(shè)計(jì)思路:將抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥和野生型擬南芥置于干旱的環(huán)境培養(yǎng)將抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥和野生型擬南芥置于干旱的環(huán)境培養(yǎng),若 若抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥在干旱環(huán)境中的生長(zhǎng)狀況優(yōu)于野生型擬南芥若抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥在干旱環(huán)境中的生長(zhǎng)狀況優(yōu)于野生型擬南芥,則說明M基因與白羊草的抗旱性有關(guān)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)和原料(dNTP);a×(236-2);D;I;因?yàn)橄拗泼窱存在于四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因這兩種標(biāo)記基因內(nèi)部,若使用限制酶I會(huì)將兩種標(biāo)記基因都破壞;將抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥和野生型擬南芥置于干旱的環(huán)境培養(yǎng);若抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥在干旱環(huán)境中的生長(zhǎng)狀況優(yōu)于野生型擬南芥
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:21引用:2難度:0.5
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