如圖為利用酵母菌“發(fā)酵”出新冠病毒疫苗的研發(fā)思路；圖中①-⑦表示過程，B處箭頭表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)（四種酶的識(shí)別序列詳見表），標(biāo)記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。
| 限制酶 | NcoⅠ | SphⅠ | NheⅠ | BamHⅠ |
| 識(shí)別序列和切割位點(diǎn) | 5’-C↓CATGG | 5’-GCATG↓C | 5’-G↓GATCC | 5’-G↓CTAGC |
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶先得到S蛋白的cDNA。擴(kuò)增該分子時(shí)，需要已知cDNA兩側(cè)的一段核苷酸序列，目的是 以便根據(jù)該序列合成引物
以便根據(jù)該序列合成引物
，每一輪循環(huán)需要依次經(jīng)過 變性、復(fù)性、延伸
變性、復(fù)性、延伸
三個(gè)階段。（2）為使③過程順利進(jìn)行，需先使用限制酶
NheⅠ和NcoⅠ
NheⅠ和NcoⅠ
切割質(zhì)粒B。此處選用兩種限制酶對(duì)新冠病毒的S蛋白基因及質(zhì)粒進(jìn)行切割的目的是 防止S蛋白基因和載體自身環(huán)化，防止S蛋白基因與載體反向連接
防止S蛋白基因和載體自身環(huán)化，防止S蛋白基因與載體反向連接
（答出2點(diǎn)即可）。（3）⑤過程主要是對(duì)成功導(dǎo)入質(zhì)粒B的P型酵母菌進(jìn)行篩選，此過程的主要操作是：
將轉(zhuǎn)化后的酵母菌接種在以蔗糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇培養(yǎng)
將轉(zhuǎn)化后的酵母菌接種在以蔗糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇培養(yǎng)
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；以便根據(jù)該序列合成引物；變性、復(fù)性、延伸；NheⅠ和NcoⅠ；防止S蛋白基因和載體自身環(huán)化，防止S蛋白基因與載體反向連接；將轉(zhuǎn)化后的酵母菌接種在以蔗糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇培養(yǎng)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/28 8:0:9組卷：0引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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