科研人員將抗鹽基因轉(zhuǎn)入普通煙草培育出抗鹽煙草,圖1表示該過程所用的質(zhì)粒,圖2表示含抗鹽基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。限制性核酸內(nèi)切酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ,它們識別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓CATC、A↓AGCTT。圖3表示該過程中利用含目的基因的農(nóng)桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化作用的示意圖?;卮鹣铝袉栴}:
(1)利用逆轉(zhuǎn)錄獲得的目的基因和從基因組文庫中獲取的目的基因的主要區(qū)別是其不含 內(nèi)含子、啟動子、終止子等內(nèi)含子、啟動子、終止子等。
(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),目的基因前需要插入啟動子,其作用是 RNA聚合酶的識別和結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNARNA聚合酶的識別和結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。
(3)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),可以用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒,用限制酶Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段,與單一酶切相比,這樣做是為了避免 目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化,目的基因與質(zhì)粒反向連接目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化,目的基因與質(zhì)粒反向連接。
(4)將目的基因插入到植物細(xì)胞染色體的DNA上,理由是 使目的基因遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)使目的基因遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。
(5)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,圖3過程 ①①(填序號)中發(fā)生了基因重組。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;限制性內(nèi)切核酸酶.
【答案】內(nèi)含子、啟動子、終止子等;RNA聚合酶的識別和結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA;目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化,目的基因與質(zhì)粒反向連接;使目的基因遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá);農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;①
【解答】
【點(diǎn)評】
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