為探究SHH基因與角化囊腫發(fā)生的相關(guān)性，科研人員利用SHH基因的非模板鏈轉(zhuǎn)錄合成的RNA作為探針，進(jìn)行分子雜交實(shí)驗(yàn)，以檢測SHH基因在角化囊腫中的表達(dá)情況．其基本流程如下圖（Amp表示氨芐青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表達(dá)）

請(qǐng)回答：
（1）重組載體中SHH基因轉(zhuǎn)錄合成RNA探針時(shí)，

需要

需要

（填“需要”或“不需要”）啟動(dòng)子．
（2）步驟②中，用Ca²⁺處理大腸桿菌，使之成為

感受態(tài)

感受態(tài)

細(xì)胞，然后導(dǎo)入重組載體．實(shí)驗(yàn)中，用添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，未導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌將會(huì)死亡，原因是這些細(xì)菌不含有

Amp

Amp

基因．
（3）能表達(dá)LacZ基因的大腸桿菌在含有IPTG和X-gal的培養(yǎng)基上會(huì)形成藍(lán)色菌落，易于識(shí)別．根據(jù)上述原理可以初步判斷

白色

白色

（填“藍(lán)色”或“白色”）菌落中的大腸桿菌為重組菌．
（4）將制備的探針加入角化囊腫切片中，探針將與

SHH轉(zhuǎn)錄的mRNA

SHH轉(zhuǎn)錄的mRNA

形成雜交帶，進(jìn)而判斷SHH基因的轉(zhuǎn)錄情況．