為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運肽基因相連，導(dǎo)入油菜葉片細胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種．
（1）從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因，然后利用PCRPCR技術(shù)分別進行擴增．
（2）如圖1，選用圖中的限制酶ClaⅠClaⅠ處理兩個基因后再用DNA連接DNA連接酶處理，得到A、DA、D（填圖中字母）端相連的融合基因．
（3）將上述融合基因插入圖2所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建基因表達載體基因表達載體并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中．將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)，得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液．
（4）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是將目的基因?qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胧荏w細胞，進一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜．
（5）用DNA-RNA分子雜交技術(shù)確定融合基因是否完成了轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄（轉(zhuǎn)錄、翻譯）．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；ClaⅠ；DNA連接；A、D；基因表達載體；四環(huán)素；將目的基因?qū)胧荏w細胞；轉(zhuǎn)錄
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：186引用：8難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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