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人類乳頭瘤病毒(HPV)有多種亞型,HPV45屬于高危型,與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)。L1蛋白是組成HPV病毒衣殼的主要結(jié)構(gòu)蛋白,科研人員進(jìn)行了HPV45的抗L1蛋白單克隆抗體的制備與研究。回答下列問題:
(1)提取HPV45的L1蛋白,注射到小鼠體內(nèi),其目的是
誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞
誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞
。一段時(shí)間后,取小鼠脾臟組織,剪碎用
胰蛋白/膠原蛋白酶
胰蛋白/膠原蛋白酶
酶處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,與小鼠骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,篩選出雜交瘤細(xì)胞。
(2)將得到的雜交瘤細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板進(jìn)行
克隆化
克隆化
培養(yǎng),分別取其上清液進(jìn)行
抗體陽性/抗體
抗體陽性/抗體
檢測(cè),檢測(cè)的原理及操作流程如圖1。經(jīng)多次篩選后,取A、B、C、D四種雜交瘤細(xì)胞上清液進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果如圖2。
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①據(jù)圖分析,實(shí)驗(yàn)過程中需將
L1蛋白
L1蛋白
作為抗原固定在固相載體上,分別取
不同稀釋倍數(shù)(濃度)的4種雜交瘤細(xì)胞上清液和未免疫小鼠血清
不同稀釋倍數(shù)(濃度)的4種雜交瘤細(xì)胞上清液和未免疫小鼠血清
加入反應(yīng)體系,經(jīng)洗滌后加入酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物,再次洗滌,加入相應(yīng)底物,復(fù)合物攜帶的酶可與相應(yīng)底物反應(yīng)顯色,測(cè)吸光值,顏色越深吸光值越高。
②圖2結(jié)果表明
四種雜交瘤細(xì)胞上清液均含有能與L1蛋白結(jié)合的抗體,且上清液A中抗體與L1蛋白結(jié)合能力最強(qiáng)
四種雜交瘤細(xì)胞上清液均含有能與L1蛋白結(jié)合的抗體,且上清液A中抗體與L1蛋白結(jié)合能力最強(qiáng)
。
③依據(jù)圖2結(jié)果,研究人員推測(cè)A、B、C、D四種上清液中,A上清液的抗體與L1蛋白結(jié)合的位點(diǎn)是HPV45型病毒識(shí)別并侵染人體細(xì)胞的關(guān)鍵位點(diǎn)。為探究此推測(cè),進(jìn)行實(shí)驗(yàn),
實(shí)驗(yàn)步驟如下:
步驟一:將小鼠宮頸細(xì)胞懸液均分為四組,編號(hào)甲、乙、丙、??;
步驟二:從稀釋倍數(shù)為1:320的A、B、C、D(雜交瘤細(xì)胞)上清液中分離提純抗體,
分別與HPV45型病毒混合,再加入到小鼠宮頸細(xì)胞懸液甲、乙、丙、丁中
分別與HPV45型病毒混合,再加入到小鼠宮頸細(xì)胞懸液甲、乙、丙、丁中
。
步驟三:在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間,檢測(cè)培養(yǎng)液中被侵染的宮頸細(xì)胞比例。實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果與結(jié)論:若
甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例高于其他組
甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例高于其他組
,則推測(cè)正確。
(3)科研人員制備HPV45的抗L1蛋白單克隆抗體,在醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用有
用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運(yùn)載藥物(或診斷試劑、治療疾病、運(yùn)載藥物)
用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運(yùn)載藥物(或診斷試劑、治療疾病、運(yùn)載藥物)

【答案】誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞;胰蛋白/膠原蛋白酶;克隆化;抗體陽性/抗體;L1蛋白;不同稀釋倍數(shù)(濃度)的4種雜交瘤細(xì)胞上清液和未免疫小鼠血清;四種雜交瘤細(xì)胞上清液均含有能與L1蛋白結(jié)合的抗體,且上清液A中抗體與L1蛋白結(jié)合能力最強(qiáng);分別與HPV45型病毒混合,再加入到小鼠宮頸細(xì)胞懸液甲、乙、丙、丁中;甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例高于其他組;用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運(yùn)載藥物(或診斷試劑、治療疾病、運(yùn)載藥物)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/7/5 8:0:9組卷:2引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6
  • 2.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7
  • 3.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請(qǐng)分析回答下列問題:
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    (1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是 
     
    ,過程②選用的骨髓瘤細(xì)胞 
     
    (選填“能”或“不能”)在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。
    (2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
     
     
    ,才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比,單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是
     
    (答出一點(diǎn))。
    (3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
     
    。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過
     
    次篩選,才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會(huì)因?yàn)?
     
    、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻,需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
    (4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
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