Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療，其技術(shù)流程如圖（圖中數(shù)字序號(hào)表示的是相關(guān)過(guò)程）。請(qǐng)回答：

（1）過(guò)程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于

MⅡ中

MⅡ中

時(shí)期，去除卵母細(xì)胞細(xì)胞核的目的是

使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞

使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞

。
（2）過(guò)程②利用的技術(shù)是

早期胚胎培養(yǎng)

早期胚胎培養(yǎng)

，當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

分離出ES細(xì)胞，ES細(xì)胞在功能上具有

發(fā)育的全能性

發(fā)育的全能性

的特點(diǎn)。
（3）過(guò)程③中獲取的目的基因是

（正常的）Rag2基因

（正常的）Rag2基因

，若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，需要構(gòu)建

含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體（正常的）

含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體（正常的）

，構(gòu)建之前可以根據(jù)

Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對(duì)序列或遺傳信息）

Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對(duì)序列或遺傳信息）

設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。將基因?qū)隕S細(xì)胞的方法通常是

顯微注射

顯微注射

法，為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用

DNA分子雜交

DNA分子雜交

技術(shù)。
（4）按此方法和圖示技術(shù)流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有

限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶

限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶

和耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）等。通測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用

抗Rag2蛋白的抗體

抗Rag2蛋白的抗體

進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。