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圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖,載體質(zhì)粒PO具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請(qǐng)回答下列問題:
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(1)用TaqDNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得的目的基因片段,其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。線性載體P1經(jīng)酶處理,在其兩端各添加了一個(gè)
胸腺嘧啶
胸腺嘧啶
,形成線性載體P2
(2)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選,得到A、B、C三類菌落,其生長(zhǎng)情況如下表(“+”代表生長(zhǎng),“-”代表不生長(zhǎng))。根據(jù)表中結(jié)果判斷,應(yīng)選擇的菌落是
B
B
(填表中字母)類,另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是
A類菌落含有P0、C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒
A類菌落含有P0、C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒

菌落類型
平板類型
A B C
無(wú)抗生素 + + +
氨芐青霉素 + + -
四環(huán)素 + - -
氨芐青霉素+四環(huán)素 + - -
(3)為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,需設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置,PCR擴(kuò)增時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是
乙和丙
乙和丙
。小明同學(xué)用圖中某對(duì)引物從一個(gè)菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段,請(qǐng)分析出現(xiàn)這種結(jié)果的原因:
目的基因反向連接
目的基因反向連接

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】胸腺嘧啶;B;A類菌落含有P0、C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒;乙和丙;目的基因反向連接
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:1難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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