腫瘤已成為嚴重危害人類健康的高發(fā)病，主要的治療手段有化療、放療和手術(shù)等，而腫瘤細胞對腫瘤藥物產(chǎn)生耐藥性是化療失敗的主要原因之一，研究表明腫瘤細胞耐藥性的產(chǎn)生與過量表達的跨膜轉(zhuǎn)運蛋白BCRP有關(guān)，研究人員嘗試建立穩(wěn)定表達BCRP的細胞系?；卮鹣铝袉栴}：
（1）研究人員從人的 癌細胞癌細胞（填“普通體細胞”或“癌細胞”）中提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄后進行PCR擴增獲得大量BCRP基因。
（2）隨后構(gòu)建BCRP基因的真核表達載體，研究人員選擇了P質(zhì)粒作為載體，因為其具有：能被真核細胞識別的啟動子，其作用是 RNA聚合酶識別和結(jié)合位點RNA聚合酶識別和結(jié)合位點；抗新霉素基因的作用是 便于將含目的基因的細胞篩選出來便于將含目的基因的細胞篩選出來。
（3）通常用兩種酶切割P質(zhì)粒和BCRP基因的原因是 避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接，將表達載體導入受體細胞的方法是 顯微注射法顯微注射法，該過程的變異類型是 基因重組基因重組。
（4）通過篩選獲得抗新霉素的受體細胞，并對其進行多次檢測，最終獲得能高效表達BCRP的細胞，在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后分瓶進行 傳代傳代（填“原代”或“傳代”）培養(yǎng)，最終獲得穩(wěn)定的細胞系，推測此細胞系在后續(xù)研究中的用途有 研究能阻止BCRP過量表達的藥物研究能阻止BCRP過量表達的藥物（寫出1點）。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】癌細胞；RNA聚合酶識別和結(jié)合位點；便于將含目的基因的細胞篩選出來；避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接；顯微注射法；基因重組；傳代；研究能阻止BCRP過量表達的藥物
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/13 8:0:9組卷：1引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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