植物甲具有極強的抗旱性,植物乙抗旱性較弱。研究人員欲將植物甲體內(nèi)的抗旱基因轉(zhuǎn)移至植物乙體內(nèi),以提高植物乙的抗旱性,回答下列問題:
(1)基因工程中使用的限制酶主要是從原核生物中分離純化獲得的。含有限制酶的細胞通常還具有相應(yīng)的甲基化酶,它可以對DNA序列進行修飾。細菌中含有的某種限制酶可以切割外源DNA,卻不破壞自身DNA,其原因可能是:①細菌自身的DNA中沒有該限制酶的識別序列細菌自身的DNA中沒有該限制酶的識別序列:②甲基化酶對細胞自身的DNA進行了修飾,導致限制酶無法識別甲基化酶對細胞自身的DNA進行了修飾,導致限制酶無法識別。
(2)為獲取抗旱基因,可以先從植物甲中提取該基因的mRNA,然后經(jīng) 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA。利用DNA來構(gòu)建基因表達載體時,必須添加 啟動子和終止子啟動子和終止子等調(diào)控元件。
(3)將抗旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌,農(nóng)桿菌可被植物細胞分泌的 酚類酚類化合物吸引,這樣農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的T-DNATi質(zhì)粒上的T-DNA就可轉(zhuǎn)移至受體細胞。含有抗旱基因的植物體細胞,需經(jīng) 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)過程才能得到轉(zhuǎn)基因植株。
(4)獲得轉(zhuǎn)基因植株后,若要確認抗旱基因是否在植株中成功表達,還需要進行個體生物學水平的鑒定,以確定植株 是否具有抗旱性以及抗旱性的程度是否具有抗旱性以及抗旱性的程度。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】細菌自身的DNA中沒有該限制酶的識別序列;甲基化酶對細胞自身的DNA進行了修飾,導致限制酶無法識別;逆轉(zhuǎn)錄;啟動子和終止子;酚類;Ti質(zhì)粒上的T-DNA;植物組織培養(yǎng);是否具有抗旱性以及抗旱性的程度
【解答】
【點評】
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