我國(guó)在國(guó)際上首次明確了病毒mRNA“加帽”后形成成熟mRNA的關(guān)鍵酶分子，并且該分子在各突變株中高度保守，在人體中沒有同源物，為發(fā)展新型、安全的廣譜抗病毒藥物提供了全新靶點(diǎn)，為優(yōu)化針對(duì)“加帽”分子的抗病毒藥物提供了關(guān)鍵科學(xué)依據(jù)。
（1）SARS-CoV-2在呼吸道黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)合成的mRNA“加帽”成熟需要的關(guān)鍵酶分子是 RNA聚合酶RNA聚合酶，如果以該酶分子為靶點(diǎn)找到了相應(yīng)的抗體，區(qū)別于一般藥物治療更具優(yōu)越性，理由是 關(guān)鍵酶分子高度保守，在人體中沒有同源物關(guān)鍵酶分子高度保守，在人體中沒有同源物。
（2）加端PCR是使擴(kuò)增產(chǎn)物的末端加上一段DNA順序的PCR，加端PCR的引物被設(shè)計(jì)成除與模板配對(duì)的那一部分以外再加上若干堿基，以便能使擴(kuò)增產(chǎn)物的末端加上額外的一段DNA。科研人員首先獲取了“加帽”關(guān)鍵酶分子抗體的mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA（互補(bǔ)的DNA鏈）。
①采用PCR技術(shù)對(duì)cDNA擴(kuò)增了n代，則第n代共需要引物 2n-12n-1個(gè)。
②構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，為了使目的基因的兩端與質(zhì)粒相應(yīng)位置具有相同的限制酶切割位點(diǎn)，據(jù)表格和圖分析，在PCR擴(kuò)增“加帽”關(guān)鍵酶分子抗體基因時(shí)設(shè)計(jì)的引物末端需要加上的最佳額外DNA序列是 5'GGATCC5'GGATCC和 5'AAGCTT5'AAGCTT。
| 酶 | BamHⅠ | SacⅠ | HindⅢ | XbaⅠ |
| 識(shí)別序列 | 5′GGATCC | 5′GAGCTC | 5′AAGCTT | 5′TCTAGA |
B淋巴細(xì)胞
B淋巴細(xì)胞
細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng)，融合后最終篩選出具有 既能無限增殖又能分泌特異性抗體
既能無限增殖又能分泌特異性抗體
特點(diǎn)的細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)或體外培養(yǎng)制備抗體。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是 特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
。【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】RNA聚合酶；關(guān)鍵酶分子高度保守，在人體中沒有同源物；2n-1；5'GGATCC；5'AAGCTT；B淋巴細(xì)胞；既能無限增殖又能分泌特異性抗體；特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：31引用：2難度：0.6
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1．CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6～5倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測(cè)，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：7引用：3難度：0.6 -
2．使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用?？贵w一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成，它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7 -
3．雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)（免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請(qǐng)分析回答下列問題：
（1）與植物體細(xì)胞雜交相比，圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是，過程②選用的骨髓瘤細(xì)胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。
（2）對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是（答出一點(diǎn)）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會(huì)因?yàn)?、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
（4）與直接使用長(zhǎng)春堿相比，將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是。發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：21引用：4難度：0.5
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