干擾素是動(dòng)物或人體細(xì)胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種糖蛋白,具有抑制細(xì)胞分裂、調(diào)節(jié)免疫、抗病毒,抗腫瘤等多種作用,是一種抗病毒的特效藥。
我國科學(xué)家采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)干擾素。具體做法是將產(chǎn)生干擾素的人白細(xì)胞的mRNA分離,反轉(zhuǎn)錄得到干擾素基因。將含有四環(huán)素、氨芐青霉素抗性基因的質(zhì)粒PBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切,然后用連接酶連接構(gòu)成重組DNA.在一定條件下將重組載體DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌,在培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng),檢測干擾素的表達(dá)量,選出高效表達(dá)的工程菌。請回答下列問題:
(1)反轉(zhuǎn)錄得到的干擾素基因是一種cDNAcDNA。與人體細(xì)胞內(nèi)的干擾素基因相比,它沒有啟動(dòng)子和內(nèi)含子啟動(dòng)子和內(nèi)含子 等結(jié)構(gòu)。
(2)基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建。已知酶A、酶B、酶C產(chǎn)生的黏性末端都不相同,質(zhì)粒PBR322和干擾素基因進(jìn)行酶切時(shí),應(yīng)選擇的兩種限制酶是酶B和酶C酶B和酶C。與單酶切相比,使用雙酶切的優(yōu)點(diǎn)是可以防止自身環(huán)化和反向連接可以防止自身環(huán)化和反向連接。
(3)在利用基因工程技術(shù)制備干擾素的過程中,受體菌除了大腸桿菌外,還可以用酵母菌作為受體菌,這兩種受體菌生產(chǎn)的干擾素在結(jié)構(gòu)上存在一定區(qū)別的原因是酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,生產(chǎn)的干擾素為糖蛋白,而大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不能對干擾素的進(jìn)行相應(yīng)的加工酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,生產(chǎn)的干擾素為糖蛋白,而大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不能對干擾素的進(jìn)行相應(yīng)的加工。
(4)干擾素在體外保存非常困難,如果將其分子中的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸,在-70℃條件下可以保存半年。實(shí)現(xiàn)這一轉(zhuǎn)變需要直接對(干擾素)基因(干擾素)基因 進(jìn)行修飾或改造,這屬于蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 工程的范疇。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】cDNA;啟動(dòng)子和內(nèi)含子;基因表達(dá)載體的構(gòu)建;酶B和酶C;可以防止自身環(huán)化和反向連接;酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,生產(chǎn)的干擾素為糖蛋白,而大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不能對干擾素的進(jìn)行相應(yīng)的加工;(干擾素)基因;蛋白質(zhì)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:9引用:2難度:0.7
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